วิธี pcr หมายถึงอะไร การวินิจฉัย PCR - การวิเคราะห์การติดเชื้อ

วิธีการที่ทันสมัยการวินิจฉัยโรคได้รับการปรับปรุงอย่างต่อเนื่องและเสริมด้วยวิธีการใหม่ในการรับข้อมูลเกี่ยวกับสถานะสุขภาพของผู้ป่วย การวิเคราะห์ PCR ได้รับการยอมรับว่าเป็นหนึ่งในการทดสอบทางการแพทย์ที่แม่นยำและน่าเชื่อถือที่สุด ทางนี้ การวิจัยในห้องปฏิบัติการได้รับการจดสิทธิบัตรในปี 1983 และผู้สร้าง Kary Mullis ได้รับรางวัลโนเบลจากการค้นพบของเขา

PCR ใช้ทำอะไร?

PCR คืออะไร? ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเป็นการศึกษาเฉพาะที่แพทย์ทั่วโลกใช้ จุลชีววิทยามีข้อมูลมากมายเกี่ยวกับโครงสร้างของไวรัสและแบคทีเรียที่เป็นสาเหตุของโรคร้ายแรง จากการศึกษาพบว่ามีการใช้ PCR ของไวรัส RNA, แอนติบอดี HSV ฯลฯ การตรวจเลือด PCR ช่วยในการระบุโรคได้ถึง 12 โรค

แต่ละการศึกษาสามารถดำเนินการแยกกันได้ ข้อบ่งชี้ทางคลินิก. นอกจากนี้ยังมีการตรวจแบบครอบคลุมที่เรียกว่า “PCR-12” ในกรณีนี้ จะทำการวิเคราะห์เชิงป้องกันสำหรับแต่ละโรคที่ PCR สามารถตรวจพบได้

• HCV RNA และโรคตับอักเสบชนิดอื่นๆ
• คำจำกัดความของโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ (chlamydia, ureplasmosis, papilloma เป็นต้น)
• mononucleosis ติดเชื้อ (ไวรัส Epstein-Barr)
• เริม
• Oncoviruses (ไวรัสเนื้องอกที่ก่อให้เกิดมะเร็ง)
• CMVI (ทดสอบสำหรับ cytomegalovirus)
• ลิสเทอริโอซิส
• โรคไข้สมองอักเสบ
• วัณโรค
• เชื้อรา (เชื้อรา)
• การติดเชื้อ Helicobacter pylori (นำไปสู่ปัญหากระเพาะอาหาร)

บางครั้งสถาบันทางการแพทย์ดำเนินการคัดกรองที่เรียกว่าการศึกษาคัดเลือกที่มุ่งเป้าไปที่พื้นที่ทางภูมิศาสตร์หรือเขตเมือง การตรวจคัดกรองเหล่านี้จำนวนมากป้องกันการระบาดของไวรัส PCR และเครื่องวิเคราะห์โรคใช้เพื่อตรวจหาโรคติดต่อ เช่น ไวรัสตับอักเสบ

คุณสามารถทำการทดสอบด้วยความคิดริเริ่มของคุณเองโดยติดต่อนักบำบัดโรคในพื้นที่เพื่อขอคำแนะนำ การตรวจหา DNA ไวรัสสำหรับ PCR ไม่ใช่ปัญหา ผลการทดสอบที่เป็นลบสามารถสงบสติอารมณ์ได้แม้กระทั่งผู้ป่วยที่น่าสงสัย

คุณสมบัติของการวิเคราะห์

คุณสามารถบริจาคโลหิตเพื่อ PCR ได้ที่คลินิกเขตหรือห้องปฏิบัติการเอกชน ในการเลือกว่าจะวิเคราะห์ที่ไหน คุณควรใส่ใจกับอุปกรณ์ทางเทคนิคของสถาบันการแพทย์ อุปกรณ์เก่าสามารถลดความน่าเชื่อถือของการวิเคราะห์ได้อย่างมาก ตามกฎแล้วการวิจัยคุณภาพสูงสามารถรับประกันได้โดยสถาบันการค้าที่ติดตั้งอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการที่ทันสมัยเท่านั้น

การวิเคราะห์ PCR เชิงคุณภาพนั้นเร็วกว่าและถูกกว่าเชิงปริมาณ อย่างไรก็ตาม ผลการทดสอบเชิงปริมาณทำให้แพทย์ทราบข้อมูลเพิ่มเติมในกรณีที่ผู้ป่วยติดเชื้อ การศึกษาประเภทนี้ทุกประเภทสามารถตรวจพบโรคได้

PCR ในช่วงแฝงของโรคสามารถตรวจพบไวรัสได้แม้ในกรณีที่ไม่มีอาการทางคลินิกที่ชัดเจนและการร้องเรียนจากผู้ป่วย

กำลังดำเนินการวิจัยในห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ ในฐานะที่เป็นสารเคมี เอนไซม์พิเศษถูกใช้เพื่อเพิ่มโครงสร้าง DNA และ RNA ของตัวอย่างทางชีววิทยาของผู้ป่วย วิธีนี้ช่วยให้ผู้ช่วยในห้องปฏิบัติการสามารถระบุเซลล์ที่เป็นอันตรายได้ด้วยสายตา ข้อมูลที่ได้รับจะถูกตรวจสอบกับฐานข้อมูลของเชื้อโรคและระบุโรคได้ นอกจากนี้ยังสามารถคำนวณอัตราส่วนเชิงปริมาณของเชื้อโรคได้อีกด้วย

หลังจากผ่านตัวอย่างทางชีวภาพ ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจะระบุเวลาของการทดสอบและจำนวนวันที่จะได้รับผล ระยะเวลาของการศึกษาขึ้นอยู่กับชนิดของการติดเชื้อ และอาจใช้เวลา 1 วันหรือสูงสุด 5 วัน ความพร้อมของผลการศึกษาขึ้นอยู่กับอุปกรณ์และปริมาณงานของห้องปฏิบัติการ การวิเคราะห์ PCR และการตีความผลลัพธ์ควรดำเนินการโดยผู้เชี่ยวชาญทางการแพทย์ที่มีคุณสมบัติเหมาะสม

วัสดุชีวภาพสำหรับการวิจัย

เพื่อให้เข้าใจถึงวิธีการวิเคราะห์ PCR เราควรรู้ว่าวัสดุชีวภาพประเภทใดที่จะได้รับการศึกษา วิธีที่พบบ่อยที่สุดในการวิเคราะห์คือการตรวจเลือดจากหลอดเลือดดำ ในกรณีส่วนใหญ่ การตรวจเลือดจะไม่ได้รับผลกระทบจากปัจจัยภายนอก เช่น การรับประทานอาหารหรือกิจวัตรประจำวัน อย่างไรก็ตาม แพทย์หลายคนไม่แนะนำให้ร่างกายรับน้ำหนักมากเกินไปและเก็บตัวอย่างเลือดในขณะท้องว่าง ยาต้านแบคทีเรียสามารถบิดเบือนผลการศึกษาได้

การวินิจฉัย PCR ของการติดเชื้อในนรีเวชวิทยาจะดำเนินการตามกฎโดยผ่านรอยเปื้อนจากพื้นผิวเมือก ตัวอย่างเป็นอย่างไร? แพทย์ที่เข้ารับการรักษาจะทำการตรวจสเมียร์หลังการตรวจ ไม้กวาดถูกวางในภาชนะพิเศษและถ่ายโอนไปยังห้องปฏิบัติการ สำหรับผู้หญิง มีข้อบ่งชี้สำหรับการวิเคราะห์สเมียร์: สาเหตุของภาวะมีบุตรยาก, ภาวะแทรกซ้อนระหว่างตั้งครรภ์, รูปแบบเฉียบพลันของโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์

สำหรับการวิเคราะห์ปัสสาวะและอุจจาระจะใช้ภาชนะปลอดเชื้อแบบพิเศษพร้อมฝาปิด นอกจากนี้ ไม่จำเป็นต้องเช็ดหรือล้างภาชนะที่ซื้อมาเพื่อการวิเคราะห์ ในระหว่างการเก็บตัวอย่าง ห้ามสัมผัสผนังด้านในของภาชนะด้วยมือหรือวัตถุแปลกปลอม ไม่แนะนำให้ใช้เงินเพิ่มเติม (สวน ฯลฯ) วัสดุไม่ควรมีสารแปลกปลอมดังนั้นควรหยุดใช้ยาเหน็บยาระบายและยาขับปัสสาวะหนึ่งสัปดาห์ก่อนการทดสอบ การวิเคราะห์จะดำเนินการภายใน 4-5 ชั่วโมงและช่วยให้คุณสามารถระบุจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคได้ ความแม่นยำสูงของการศึกษาทำให้สามารถตรวจหาเซลล์ที่ทำให้เกิดโรคได้แม้แต่เซลล์เดียวในตัวอย่างทางชีวภาพของผู้ป่วย

วิธีการวิเคราะห์

การตรวจเลือดสำหรับ PCR จะทำจากหลอดเลือดดำในสภาพห้องปฏิบัติการในขณะท้องว่างอย่างเคร่งครัด การส่งมอบวัสดุชีวภาพอื่นจะดำเนินการในห้องปฏิบัติการ สำนักงานของแพทย์ที่เข้าร่วม หรือที่บ้าน จะเก็บตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์ได้ที่ไหน แพทย์ที่เข้าร่วมจะแจ้งให้คุณทราบเมื่อมีการส่งต่อ จำเป็นต้องมีการเตรียมผู้ป่วยก่อนส่งตัวอย่างทางชีวภาพ ข้อกำหนดทั่วไปคือการไม่มีความเครียดทางร่างกายและจิตใจในร่างกายเป็นเวลา 2-3 วันก่อนการทดสอบ แพทย์ที่เข้าร่วมจะบอกวิธีการทดสอบ PCR อย่างถูกต้อง

การเตรียมการตรวจเลือด PCR รวมถึงการหลีกเลี่ยงแอลกอฮอล์ 48 ชั่วโมงก่อนนำตัวอย่าง ถ่ายเลือดในขณะท้องว่างก่อนการทดสอบจะอนุญาตให้ดื่มน้ำสะอาดเท่านั้น

หากมีการศึกษาทางชีวเคมีพร้อมๆ กัน กฎสำหรับการเตรียมตัวสำหรับการศึกษาจะเข้มงวดยิ่งขึ้น

ผู้ป่วยจำนวนมากมีความสนใจในคำถามนี้ เป็นไปได้ไหมที่จะทำการทดสอบในช่วงมีประจำเดือน? ขึ้นอยู่กับตัวอย่างทางชีวภาพ ควรตรวจทางนรีเวชและตรวจปัสสาวะเมื่อหมดประจำเดือน สำหรับเลือด น้ำลาย และตัวอย่างอื่นๆ รอบประจำเดือนผู้หญิงจะไม่ได้รับผลกระทบ

ควรทำการวิเคราะห์ปัสสาวะและอุจจาระที่บ้านวัสดุที่บริจาคจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการในภาชนะพิเศษ ก่อนส่งต่ออุจจาระ PCR คุณควรหยุดใช้ยาที่ส่งผลต่อสีของอุจจาระ หนึ่งวันก่อนส่งเนื้อหาขอแนะนำให้ไม่รวมการติดต่อทางเพศ ยาต้านแบคทีเรียหยุดใช้ 2-3 สัปดาห์ก่อนการทดสอบ ปัสสาวะผ่านในขณะท้องว่าง

ผลการวิจัย

แพทย์ของคุณอาจสั่งการทดสอบในห้องปฏิบัติการเชิงคุณภาพหรือเชิงปริมาณ การวิเคราะห์แสดงให้เห็นอะไร? การศึกษาในห้องปฏิบัติการประเภทนี้ใช้ในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อและไวรัส ผลที่ได้ทำให้แพทย์สามารถระบุได้ว่าบุคคลนั้นป่วยหรือมีสุขภาพดี ผลลัพธ์ PCR มีความแม่นยำและเฉพาะเจาะจงสูง ในกรณีส่วนใหญ่ นี่เป็นคำตอบง่ายๆ ในเชิงลบหรือเชิงบวก ซึ่งเข้าใจได้แม้กระทั่งกับคนที่ไม่มีการศึกษาด้านการแพทย์ แต่มีคุณสมบัติบางอย่างในการถอดรหัสผลลัพธ์

• PCR negative หมายความว่าไม่พบร่องรอยของโรคในวัสดุทดสอบ
• PCR เชิงคุณภาพแสดงให้เห็นว่ามีหรือไม่มีไวรัสในวัสดุชีวภาพ แต่ไม่ใช่จำนวน
• ผลการศึกษาเชิงปริมาณให้ข้อมูลเกี่ยวกับจำนวนไวรัสที่มีอยู่ในร่างกาย การทดสอบเดียวกันกำหนดระยะของโรค (เรื้อรัง, เฉียบพลัน, เฉียบพลัน)

การตีความผลลัพธ์ดำเนินการโดยแพทย์ที่เข้าร่วม ในบางกรณี ปฏิกิริยาเชิงบวกไม่ได้หมายความว่าผู้ป่วยป่วย การขนส่งไวรัสที่ "แข็งแรง" ก็เป็นไปได้เช่นกัน การได้รับผลลบที่เป็นเท็จเป็นไปได้หากการติดเชื้อเข้าสู่ร่างกายแล้ว แต่ยังไม่ได้เริ่มการติดเชื้อ ใน 5% ของกรณี ผลของการวิเคราะห์มีข้อผิดพลาดเนื่องจากการไม่ปฏิบัติตามคำแนะนำของผู้ป่วยในการเตรียมตัวสำหรับการศึกษาหรือการกระทำที่ผิดพลาดของพนักงานในห้องปฏิบัติการ

ข้อดีของวิธีการ

PCR เป็นวิธีการวินิจฉัยที่ทันสมัยและแม่นยำที่สุดในปัจจุบัน ค่าใช้จ่ายในการวิจัยค่อนข้างสูง ตามกฎแล้วห้องปฏิบัติการขนาดใหญ่จะให้ส่วนลดสำหรับการสอบที่ครอบคลุม

ตัวอย่างเช่น "PCR-12" สำหรับการศึกษาพารามิเตอร์ที่แตกต่างกัน 12 ตัวจะเสียค่าใช้จ่ายน้อยกว่าการวิเคราะห์สำหรับแต่ละพารามิเตอร์แยกกัน

การวิเคราะห์มีข้อดีที่ปฏิเสธไม่ได้หลายประการเหนือวิธีการวินิจฉัยอื่นๆ:

• การกำหนดส่วนที่ไม่ซ้ำกันของสายโซ่ RNA ของการติดเชื้อช่วยให้คุณระบุสาเหตุของโรคได้อย่างแม่นยำ
• วิธีการที่เป็นสากลในการศึกษานี้ทำให้สามารถระบุโรคได้หลายโรคพร้อมกันในตัวอย่างทางชีววิทยาของผู้ป่วยรายเดียว
• การทดสอบ PCR สามารถระบุการปรากฏตัวของโรคได้แม้กระทั่งก่อนเริ่มมีอาการทางคลินิกและการร้องเรียนในผู้ป่วย ซึ่งทำให้สามารถเริ่มการรักษาได้โดยเร็วที่สุด
• วิธีการนี้มีความไวสูง การทดสอบตรวจพบแม้กระทั่งเซลล์ของเชื้อโรค
• การปรับปรุงอย่างต่อเนื่องในการประมวลผลตัวอย่างทางชีวภาพทุกปีจะช่วยเพิ่มคุณภาพของการวิจัย

การวิเคราะห์หา PCR หรือปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสมักจะถูกกำหนดเมื่อตรวจพบอาการของโรคหรือหลังจากการสัมผัสกับผู้ป่วย การทดสอบนี้สามารถแสดงการมีอยู่ของไวรัสได้แม้ว่าจะไม่มีอาการของโรคก็ตาม บุคคลใดก็ตามที่พูดคุยกับนักบำบัดโรคแล้วสามารถผ่านการวิเคราะห์ที่ง่ายและเชื่อถือได้นี้ การตีความการวิเคราะห์ PCR ดำเนินการโดยแพทย์ผู้ทรงคุณวุฒิ ใบรับรองการไม่มีโรคอาจมีอายุหลายสัปดาห์หรือหลายเดือน ขึ้นอยู่กับประเภทของการติดเชื้อ

ติดต่อกับ

เป็นครั้งแรกที่มีการกล่าวถึงการวิเคราะห์ PCR ในปี 1983 เทคนิคนี้พัฒนาโดย Cary Mullis และเจ้าหน้าที่ห้องปฏิบัติการของเขา นับแต่นั้นมาความนิยมในการศึกษาก็เพิ่มขึ้นเรื่อยๆเพราะ มีข้อดีมากกว่าวิธีอื่นๆ เป็นจำนวนมาก

ปัจจุบัน การวินิจฉัย PCR เป็นเกณฑ์มาตรฐานหรือมาตรฐานในการตรวจหาการติดเชื้อและเชื้อโรค โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ไม่แสดงอาการ ประการแรกคือการวินิจฉัยพรีคลินิก

ดำเนินการวิเคราะห์ในเครื่อง PCR

สาระสำคัญของการวิเคราะห์ PCR อยู่ในความจริงที่ว่าในหลอดทดลองที่โคลน (เพิ่มขึ้นทวีคูณ) ลำดับของกรดนิวคลีอิก (DNA หรือ RNA) มีลักษณะเฉพาะของเชื้อโรคบางชนิด

PCR ย่อมาจากปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส

บ้าน ลักษณะเด่นของวิธีนี้คือการขยายเสียง กล่าวคือ การสร้าง จำนวนมากสำเนาของยีนที่ต้องการหรือชิ้นส่วนของมัน ทั้งหมดนี้ผลิตขึ้นนอกร่างกาย กล่าวคือ ในหลอดทดลอง

ดังนั้นหากมีการทำ PCR 20 รอบ ก็จะได้สำเนาประมาณ 1 ล้านชุดขึ้นไป ทำให้สามารถตรวจจับการติดเชื้อได้แม้ว่าจะมีจำนวนเล็กน้อยในแหล่งข้อมูล เมื่อวิธีการวิเคราะห์แบบอื่นไม่มีอำนาจ ซึ่งจะกำหนดความไวสูงของวิธีนี้

พูดง่ายๆ ก็คือ คุณสามารถวาดภาพเปรียบเทียบได้ - คุณจะไม่สังเกตเห็นเม็ดทรายเม็ดเล็กๆ บนพื้น แต่หลังจากเพิ่มจำนวนเม็ดทรายขึ้นเป็นล้านเท่า (PCR) แล้ว กองทรายก็จะมองเห็นได้ชัดเจน .

ข้อได้เปรียบหลักของการวิเคราะห์การติดเชื้อโดยวิธี PCR คือ:

• ความไวสูงสุดและความจำเพาะเมื่อเทียบกับวิธีการอื่นๆ ที่ใช้ในการตรวจหาเชื้อ
• ความสามารถในการตรวจหาจุลินทรีย์ในสารชีวภาพที่หลากหลาย (เลือด ปัสสาวะ สารคัดหลั่งจากช่องคลอด น้ำลาย ฯลฯ );
• ความสามารถในการระบุจุลินทรีย์ที่เป็นสาเหตุหลายอย่างพร้อมกัน หากมี สำหรับการเปรียบเทียบการใช้วิธีการทางแบคทีเรียไม่ได้ให้โอกาสดังกล่าวเพราะ จำเป็นต้องใช้สื่อต่าง ๆ ในการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคต่างๆ
• ความเป็นไปได้ของการขนส่งวัสดุชีวภาพเพราะ เพื่อระบุเชื้อโรคไม่จำเป็นต้องให้มันมีชีวิตอยู่
• ความเร็วในการวิเคราะห์
• ความถูกต้องของการวินิจฉัยสาเหตุ
• ความเป็นไปได้ของการกำหนดปริมาณของเชื้อโรค - สำคัญอย่างยิ่งสำหรับจุลินทรีย์ฉวยโอกาสซึ่งหลังจากถึงความเข้มข้นที่แน่นอนสามารถทำให้เกิดโรคได้
• ความสามารถในการควบคุมกระบวนการติดเชื้อระหว่างการรักษา

การวิเคราะห์ PCR สำหรับการติดเชื้อ

ในปัจจุบัน วิธีการทำปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสเป็นตัวกำหนดโรคติดเชื้อทางเพศ (และอื่น ๆ ) ส่วนใหญ่ การวินิจฉัยเป็นที่แพร่หลายเนื่องจากมีความไวและความจำเพาะสูง

การวิเคราะห์ PCR สำหรับหนองในเทียมเป็นที่นิยมอย่างมาก

เนื่องจากจุลินทรีย์เหล่านี้อาศัยอยู่ภายในเซลล์ ซึ่งสร้างปัญหาบางอย่างในการตรวจหา

การวินิจฉัยด้วย PCR ทำให้สามารถตรวจพบเชื้อหนองในเทียมได้เพียงเล็กน้อย ซึ่งตามกฎแล้ว ยังไม่ทำให้เกิดอาการทางคลินิก แม้แต่การมีโมเลกุลกรดนิวคลีอิกเพียง 2 โมเลกุลในวัสดุทดสอบทำให้สามารถระบุสาเหตุของการติดเชื้อได้

และนี่คือกุญแจสู่ความสำเร็จในการรักษา ซึ่งเริ่มต้นที่ระยะพรีคลินิก

การติดเชื้อยังระบุ:

• ไวรัสตับอักเสบ;
• วัณโรค;
• โรคไข้สมองอักเสบที่เกิดจากเห็บ;
• กามโรคต่างๆ เป็นต้น

การวินิจฉัย PCR ช่วยให้สามารถแก้ปัญหาที่สำคัญอื่นๆ ได้หลายประการ:

• ติดตามการรักษาและประเมินประสิทธิผล
• การกำหนด "ปริมาณไวรัส" โดยพิจารณาจากการเลือกขนาดยาเป็นรายบุคคล
• การระบุสายพันธุ์ของจุลินทรีย์ที่ดื้อยา (ไม่ไวต่อยา)

การเตรียมการส่งมอบการวิเคราะห์

ไม่จำเป็นต้องเตรียมการส่งมอบการวิเคราะห์โดย PCR อย่างตั้งใจ อย่างไรก็ตาม เป็นสิ่งสำคัญมากที่ผู้เชี่ยวชาญจะนำวัสดุนี้ไปใช้ตามเงื่อนไขที่จำเป็นทั้งหมดของการเป็นหมัน

ตัวอย่างเช่น ควรใช้ระบบสุญญากาศพิเศษเพื่อเจาะเลือด ควรใช้หลอดทดลองพิเศษเพื่อไขความลับของอวัยวะสืบพันธุ์ เป็นต้น

ในบางกรณี วัสดุต้องถูกขนส่งไปยังห้องปฏิบัติการ ในการทำเช่นนี้อย่างถูกต้องจำเป็นต้องปิดภาชนะด้วยวัสดุชีวภาพอย่างผนึกแน่น ซึ่งจะป้องกันการแทรกซึมของจุลินทรีย์อื่นๆ ที่อาศัยอยู่ในสภาพแวดล้อมภายนอก

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ PCR สามารถมีสองทางเลือก:

• ผลบวก - ตรวจพบเชื้อโรค;
• เชิงลบ - ไม่พบเอเจนต์เชิงสาเหตุ

คุณควรทราบ - แม้ในกรณีที่ไม่มีอาการทางคลินิกก็สามารถได้รับผลลัพธ์ที่เป็นบวก

ในกรณีนี้จำเป็นต้องเน้นที่ข้อมูลของปฏิกิริยาโพลีเมอเรสเพราะ ช่วยในการระบุโรคในระยะพรีคลินิก

บางครั้งอาจได้คำตอบที่น่าสงสัยเมื่อจำนวนสำเนาที่ระบุตรงกับขีดจำกัดบนของบรรทัดฐาน เพื่อชี้แจงสาเหตุของโรคควรทำการวิเคราะห์ซ้ำโดยให้ความสนใจเป็นพิเศษกับเงื่อนไขในการรวบรวมวัสดุชีวภาพ

การวินิจฉัย PCR มีความแม่นยำเพียงใด?

ข้อได้เปรียบหลักของการวินิจฉัย PCR สามารถกำหนดได้ในรูปแบบของวิทยานิพนธ์หลายประการ:

• ความเป็นไปได้ที่จะได้รับสำเนาจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคจำนวนมาก
• สำเนาจำนวนมากเป็นกุญแจสำคัญในการจัดลำดับ (การตรวจจับ) ที่ประสบความสำเร็จ

สิ่งนี้ให้การวิเคราะห์ PCR ที่มีความแม่นยำสูงสำหรับการตรวจหาเชื้อโรคในเซลล์และจุลินทรีย์ที่เติบโตช้า

ดังนั้น วิธีการนี้จึงเป็นข้อมูลเฉพาะสำหรับการตรวจหาเชื้อมัยโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส และสารติดเชื้ออื่นๆ ที่คล้ายคลึงกัน มีความแม่นยำสูงสุดและไม่ต้องตรวจสอบผลลัพธ์ที่ได้รับอีกครั้ง (ยกเว้นกรณีสบายๆ)

เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือที่สุด ต้องปฏิบัติตามเงื่อนไขหลักสองประการที่ป้องกันการติดเชื้อจากภายนอก (ภายนอก):

• ปริมาณวัสดุที่ถูกต้อง
• การขนส่งที่ถูกต้อง

การวินิจฉัย PCR(ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส) ใช้เพื่อตรวจหาระยะลุกลามของโรคร่วมกับการศึกษาแบบดั้งเดิมอยู่แล้ว เมื่อไม่มีปฏิกิริยาโดยวิธีการวินิจฉัยทางภูมิคุ้มกันวิทยาและจุลชีววิทยา

ในช่วงระยะเวลาหนึ่ง การวินิจฉัย PCR ถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์ทางวิทยาศาสตร์เท่านั้น และเริ่มตั้งแต่ปลายศตวรรษที่ 20 ถึงต้นศตวรรษที่ 21 เท่านั้น การวิเคราะห์นี้จึงกลายเป็น "มาตรฐานทองคำ" ซึ่งเป็นประโยชน์อย่างมากในด้านต่างๆ ของยา

สาระสำคัญของการวินิจฉัย PCR คืออะไร?

การวินิจฉัย PCR ตรงกันข้ามกับการตรวจที่สามารถตรวจพบร่องรอยของแอนติบอดี (AT) ไม่เพียงแต่สร้างสาเหตุที่แท้จริงของสภาวะทางพยาธิวิทยา แต่ยังตรวจพบการมีอยู่ของ DNA หรือ RNA บนไซต์เฉพาะโดยใช้เอนไซม์ในห้องปฏิบัติการ

การวิเคราะห์ PCR มีความแม่นยำสูง ขจัดความเป็นไปได้ที่จะเกิดปฏิกิริยาที่ผิดพลาด และไม่จำเป็นต้องนำเลือดจากหลอดเลือดดำไปตรวจ ตัวอย่างเนื้อเยื่อจำนวนเล็กน้อย ของเหลวชีวภาพก็เพียงพอแล้ว

สำหรับตัวแปรข้างต้นของสภาพแวดล้อมทางชีวภาพของวัสดุสำหรับการทดสอบที่มีสารที่สงสัยว่าติดเชื้อ การตัดสินใจของแพทย์สามารถกำหนดทางเลือกได้หลายทางพร้อมกัน ซึ่งรวมถึงสิ่งนี้อาจเป็น:

• ละเลง(ปล่อยออกจากอวัยวะเพศ);
• การขูดออกจากเยื่อเมือก(ปาก, จมูก, อวัยวะเพศ);
• น้ำลาย, เสมหะหรือของเหลวในเยื่อหุ้มปอด;
• น้ำต่อมลูกหมาก, การศึกษาการหลั่งต่อมลูกหมากสำหรับศัตรูพืช;
• เนื้อเยื่อรกหรือน้ำคร่ำ
• การตรวจปัสสาวะทั่วไปเพื่อศึกษาตะกอน (หลังการหมุนเหวี่ยง) หากจำเป็น ให้ตรวจหาเชื้อมัยโคแบคทีเรียม ทูเบอร์คูโลซิส
• น้ำไขสันหลังสำหรับการตรวจหารอยโรคของระบบประสาทส่วนกลาง
• การสะสมของเซลล์หรือเนื้อเยื่อ(การตรวจชิ้นเนื้อ) จากตับ ลำไส้เล็กส่วนต้น กระเพาะอาหาร เป็นต้น

ตัวอย่างเหล่านี้ถูกวางไว้ในเครื่องปฏิกรณ์พิเศษและวิเคราะห์โดยการเพิ่มทวีคูณ (การขยาย) ของชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ศึกษา โดยวงจรการจำลองแบบซ้ำและการทำให้เสียสภาพด้วยการเพิ่มเอ็นไซม์จำเพาะสำหรับการสังเคราะห์ ตามประเภทของปฏิกิริยาลูกโซ่ วิธีการนี้จะระบุประเภทและลักษณะเฉพาะของ DNA หรือ RNA ในที่สุด กระบวนการ PCR การวิเคราะห์เปรียบเทียบสารพันธุกรรมที่ลอกแบบมาทำให้คุณสามารถระบุได้แม้กระทั่งเซลล์เดียวของไวรัสที่มีชีวิต แยกแยะยูเรียพลาสมาจากไมโคพลาสมาหรือ

ข้อดีและข้อเสียของการวินิจฉัย PCR

การวินิจฉัย PCR นี้มีทั้งข้อดีและข้อเสียหลายประการ

ประโยชน์ของการวินิจฉัย:

• คำจำกัดความของเชื้อโรคบ่งชี้โดยตรงว่ามีอยู่ในสารพันธุกรรมของส่วนที่ผิดปรกติของ DNA หรือ RNA
• การวินิจฉัย PCR ให้ความแม่นยำ 100% เนื่องจากมีอยู่ในวัสดุทดสอบของอนุภาคกรดนิวคลีอิก (ชิ้นส่วน DNA หรือ RNA) ซึ่งมีลักษณะเฉพาะของไวรัสหรือแบคทีเรียที่เฉพาะเจาะจงเท่านั้น
• ความไวสูงของระบบ PCR เมื่อเทียบกับวิธีการวินิจฉัยอื่น ๆ การวิเคราะห์ PCR เพื่อระบุการปรากฏตัวของเชื้อโรคก็เพียงพอแล้วสำหรับหนึ่งเซลล์ของไวรัสที่มีชีวิต (10-100 เซลล์ในตัวอย่าง) ซึ่งทำให้สามารถตรวจพบจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในระยะเริ่มต้นของโรคได้โดยไม่มีอาการรุนแรง และในรูปแบบขั้นสูง
• การขยาย PCR อัตโนมัติที่มีเทคโนโลยีสูงจะเพิ่มความเร็วในการวิเคราะห์โดยการทดสอบในวันที่ทำการสุ่มตัวอย่าง (จัดสรรไม่เกิน 4-6 ชั่วโมงสำหรับการวินิจฉัย) สิ่งนี้จะเพิ่มผลผลิตและให้ความเหนือกว่าวิธีการวิจัยทางวัฒนธรรม
• ความเก่งกาจของการวิเคราะห์ช่วยให้สามารถใช้สารพันธุกรรมของ DNA หรือ RNA ที่ถ่าย ตัวเลือกต่างๆเพื่อตรวจหาเชื้อโรคหลายชนิดจากตัวอย่างทางชีวภาพหนึ่งตัวอย่าง

พูดถึงข้อเสียเมื่อพิจารณาถึงความไวของระบบ PCR ช่วงเวลาอันไม่พึงประสงค์ประการหนึ่งคือ:

• ความแปรปรวนของจุลินทรีย์ ข้อเสียคือการกลายพันธุ์ที่มีอยู่ในจุลินทรีย์ นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงในจีโนไทป์ที่ศึกษาของเชื้อโรค และระบบทดสอบ PCR ในบริเวณที่ขยายของจีโนมไม่สามารถจับลูกผสมของเชื้อโรคที่พัฒนาแล้วได้ เช่นเดียวกับที่ระบบภูมิคุ้มกันของมนุษย์ไม่รู้จัก ดังนั้นจะไม่มีปฏิกิริยาใดๆ ต่อการพิจารณาว่ามีโรคติดเชื้อ แต่สำหรับสิ่งนี้ การพัฒนาต่างๆ อยู่ระหว่างการปรับปรุงวิธี PCR;
• ความเป็นไปได้ที่จะได้รับผลบวกลวงหรือผลลบลวง เพื่อไม่ให้พบผลลัพธ์ที่เป็นเท็จในขั้นตอนใดขั้นตอนหนึ่งของการวินิจฉัย PCR จะต้องดำเนินการอย่างระมัดระวังโดยไม่ละเมิดกระบวนการโดยปฏิบัติตามกฎในการรวบรวมวัสดุ ตัวอย่างสามารถเปลี่ยนโครงสร้างหรือพังได้ ซึ่งอาจนำไปสู่ผลลบที่เป็นเท็จหรือผลบวกลวง ควรเข้าใจว่าผลดังกล่าวอาจเกิดขึ้นได้เมื่อการติดเชื้อถูกฆ่าไปแล้ว แต่เซลล์ที่ตายแล้วไม่มีเวลาที่จะต่ออายุตัวเองและถูกนำมาพิจารณาในระหว่างการโคลน ดังนั้น บน วันแรกหลังการรักษาจะใช้วิธีการอื่น (เช่น) และหลังจากการกำจัดเชื้อโรคที่ไม่ใช้งานออกจากร่างกายโดยสมบูรณ์แล้วจะมีการดำเนินการวิเคราะห์และควบคุมโดย PCR และแล้วแพทย์ที่เข้าร่วมก็ยอมรับ การตัดสินใจครั้งสุดท้ายเกี่ยวกับความเหมาะสมของการบำบัดโดยคำนึงถึงข้อโต้แย้งทั้งหมด "สำหรับ" และ "ต่อต้าน"

การเตรียมตัวสำหรับการวินิจฉัย PCR และเงื่อนไขสำหรับการทดสอบ

ควรให้ความสนใจกับการเตรียม PCR อย่างง่ายสำหรับสิ่งนี้จำเป็นต้องปฏิบัติตามคำแนะนำทั้งหมดของแพทย์ที่เข้าร่วมอย่างเคร่งครัดและปฏิบัติตามเงื่อนไขที่ปฏิเสธไม่ได้อย่างน้อยสองสามข้อเพื่อผลลัพธ์ที่แม่นยำยิ่งขึ้น

ขึ้นอยู่กับวิธีการสุ่มตัวอย่างวัสดุสำหรับการตรวจสอบต้องจำไว้ว่า:

• เพื่อตรวจวินิจฉัยด้วยเลือดดำผู้ป่วยต้องได้รับการทดสอบในขณะท้องว่าง ยกเว้นการใช้ของเหลว
• ให้ละเลงจำเป็นต้องละเว้นจากการติดต่อทางเพศอย่างน้อยสองสามวันได้รับอนุญาตให้ดำเนินการสุขอนามัยของอวัยวะสืบพันธุ์ในตอนเย็น แต่ไม่ใช่ในวันที่ทำการทดสอบ ควรเลือกเวลาที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการศึกษาโดยคำนึงถึง: สองวันก่อนหรือหลังรอบเดือน
• สำหรับวิธีการสุ่มตัวอย่างใดๆควรหยุดสองสามสัปดาห์ก่อนส่งมอบการใช้สารต้านเชื้อแบคทีเรีย ยาเมื่อได้ปรึกษากับแพทย์ของคุณแล้วเนื่องจากอาจส่งผลต่อความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์
• เพื่อตรวจปัสสาวะเพื่อตรวจสอบการปรากฏตัวของเชื้อโรค ไม่เพียง แต่ต้องสังเกตความเป็นหมันและสุขอนามัยเท่านั้น แต่ยังต้องคำนึงถึงคุณภาพด้วย รวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัยที่แม่นยำยิ่งขึ้น ดังนั้นจึงเป็นที่ยอมรับได้ที่จะรอ 2-3 ชั่วโมงจากการปัสสาวะครั้งสุดท้ายจนถึงการเก็บปัสสาวะ หรือใช้ตัวอย่างตอนเช้า ซึ่งมีความเป็นไปได้สูงที่จะแสดงกระบวนการอักเสบ

การใช้ PCR และโรคที่ตรวจพบ

ในการค้นหาสาเหตุของโรคต่าง ๆ ไม่ควรละเลยคำแนะนำข้างต้นและการตรวจตามที่กำหนดโดยแพทย์โดยใช้วิธีการวินิจฉัย PCR สามารถป้องกันไม่เพียง แต่ผู้ใหญ่เท่านั้น แต่ยังรวมถึงเด็กที่ยังไม่เกิดในครรภ์จากโรคแทรกซ้อนร้ายแรง .

ท้ายที่สุดแล้ว ประชากรครึ่งหนึ่งเป็นผู้หญิงที่ส่วนใหญ่มักป่วยด้วยไวรัสบางชนิด (HPV) ซึ่งเพิ่มโอกาสของมะเร็งปากมดลูกหรือภาวะมีบุตรยากได้อย่างมาก และเมื่อพิจารณาถึงผลกระทบด้านลบที่อาจเกิดขึ้นในระหว่างตั้งครรภ์และต่อพัฒนาการของทารกในครรภ์ ควรระลึกไว้เสมอว่าจุลินทรีย์กลุ่มต่างๆ ที่ติดต่อทางเพศสัมพันธ์หรือมีภูมิคุ้มกันบกพร่องนั้นยากที่จะระบุถึงกลุ่มของเชื้อโรคกลุ่มใดกลุ่มหนึ่ง เนื่องจากมีความเกี่ยวข้องกันมาก (เช่น การติดเชื้อ TORCH และ STI ) แต่ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสสามารถค้นหาโครงสร้างแปลกปลอมโดยกำหนดประเภทเฉพาะของ DNA ของไวรัสในร่างกายของผู้หญิง

การถอดรหัสผลการวิเคราะห์ช่วยให้คุณสามารถยืนยันหรือหักล้างการปรากฏตัวของโรคได้ ครอบคลุมความหลากหลายของเชื้อโรค การวิเคราะห์ดังกล่าวมีความเกี่ยวข้องอย่างมากสำหรับการตรวจหาการติดเชื้อจำนวนมากในเวลาที่เหมาะสม เช่น:

• การตรวจหาเชื้อเอชไอวี. การด้อยค่าของภูมิคุ้มกันอย่างรุนแรงจากการติดเชื้อที่ส่งผลต่อเซลล์ภูมิคุ้มกันบกพร่องที่มีอยู่บนพื้นผิวของระบบภูมิคุ้มกันบนตัวรับ CD4 เป็นหลัก ซึ่งต่อมาสูญเสียความสามารถในการป้องกันตนเองจากการติดเชื้อและหยุดตอบสนองต่อการปรากฏตัวของไวรัส RNA ในเลือด เมื่อไหร่ ผลบวกด้วยการตรวจสอบแบบไม่ระบุชื่อ จะมีการทำซ้ำด้วยการเพิ่มการศึกษาเพิ่มเติม
• ไวรัสตับอักเสบ ส่วนใหญ่มักเป็นไวรัสตับอักเสบซี(ประกอบด้วยเชื้อก่อโรค RNA) ซึ่งเนื่องจากความทนทานง่ายจึงวินิจฉัยได้ยากด้วยวิธีการอื่น เนื่องจากวิธี PCR เหมาะสมที่สุดในการตรวจหาเชื้อโรคในเลือดหรือการตรวจชิ้นเนื้อตับ ปรากฏตัวในระยะหลังทำให้เกิดกระบวนการอักเสบที่ร้ายแรง อย่างไรก็ตาม ควรพิจารณาว่าหากผลการทดสอบเป็นบวกในระหว่างการทดสอบการมีแอนติบอดีในเลือด (AT) และการทดสอบ PCR ให้ผลลบ อาจบ่งชี้ว่ามีไวรัสในร่างกายมาก ปริมาณต่ำหรือเซลล์ที่ได้รับผลกระทบอยู่ในระยะรอดำเนินการในจีโนมของเซลล์ตับโดยไม่สามารถเข้าถึงกระแสเลือด ในกรณีเช่นนี้ จะมีการศึกษาซ้ำหลายครั้งสำหรับวิธีการวินิจฉัยและการรักษาขั้นสุดท้าย
• ไวรัสก่อมะเร็ง เช่น HPV(human papillomavirus) ที่มีไวรัสมากกว่า 100 ชนิด, การติดต่อทางเพศสัมพันธ์หรือในระหว่างขั้นตอนทางการแพทย์, ทารกแรกเกิดจะติดเชื้อทางช่องคลอดจากมารดาหากเธอเป็นพาหะของการติดเชื้อ papillomavirus;
• โรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์(การติดเชื้อทางเพศสัมพันธ์);
• เหมาะสำหรับการตรวจหาโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ทั้งหมด(, gardnerellosis,) และการติดเชื้อ TORCH;
• บ่งบอกถึงความเที่ยงตรงสูง มีการติดเชื้อโมโนนิวคลีโอสิสซึ่งสามารถตรวจพบโดยวิธี PCR วินิจฉัย โดยใช้ซีรั่มในเลือดเป็นวัสดุในการทดสอบ ตามพารามิเตอร์ภายนอกโรคของ Filatov สามารถแสดงออกได้ว่าเป็นผื่น, ผิวคล้ำ, เคลือบสีขาวบนลิ้น
• การเจาะเลือดของผู้ป่วยเอดส์และผู้รับการปลูกถ่ายอวัยวะด้วยการใช้ยาเพื่อกดภูมิคุ้มกัน
• การติดเชื้อเริมเป็นตัวแทนของโรคเริมชนิดหนึ่งหรืออีกชนิดหนึ่งที่อาจส่งผลต่ออวัยวะเพศ เยื่อเมือกของดวงตาหรือผิวหนัง
• วัณโรค. ในการปรากฏตัวของอาการหลักของโรคการวิเคราะห์ PCR ถูกกำหนดหลังจากผลการตรวจ bronchoscopy ช่วยให้คุณสามารถวินิจฉัยระยะที่ใช้งานของวัณโรคได้เร็วกว่าการใช้วิธีการทางแบคทีเรียหรือแบคทีเรีย
• โรคติดเชื้อไวรัส เช่น โรคไข้สมองอักเสบที่เกิดจากเห็บ(บอร์เรลิโอซิส). โดดเด่นด้วยความเสียหายของเซลล์ ระบบประสาท, มึนเมา, การอักเสบของสมองและต่อมาการพัฒนาของอัมพาต. ในการตรวจหาแอนติเจนโดยใช้การวินิจฉัยด้วย PCR เลือดและน้ำไขสันหลังจะถูกนำมาใช้เพื่อแยกไวรัสอาร์เอ็นเอ
• การตรวจหาเชื้อเฮลิโคแบคเตอร์ ไพโลไร(นำไปสู่โรคกระเพาะเรื้อรัง แผลในกระเพาะอาหาร เนื้องอกในกระเพาะอาหาร) โดยการตรวจ PCR ช่วยให้สามารถตรวจหา DNA ของเชื้อ Helicobacter pylori (สารพันธุกรรม) ในการตรวจชิ้นเนื้อ อุจจาระ น้ำลาย แยกแยะสายพันธุ์ตามระดับของมะเร็งได้

การวินิจฉัย PCR ของการติดเชื้อมีการพัฒนาอย่างรวดเร็วและประสบความสำเร็จในการใช้ในด้านเนื้องอกวิทยา นรีเวชวิทยา ระบบทางเดินปัสสาวะ ระบบทางเดินอาหาร ไวรัสวิทยา และรายการได้รับการปรับปรุงอย่างต่อเนื่อง แต่ไม่ จำกัด เฉพาะการค้นหาเชื้อโรคของโรคติดเชื้อ ท่ามกลางส่วนที่เหลือ การใช้งานจริงวิธี PCR ยังสามารถเน้นการใช้การวิจัยเพื่อสร้างความเป็นพ่อและระบุตัวบุคคล

เทคนิคนี้มีชื่อเสียงในด้านความแม่นยำและความเก่งกาจ ด้วยการตรวจ PCR จุลินทรีย์ที่เป็นอันตรายหลายชนิดสามารถตรวจพบได้พร้อม ๆ กันในตัวอย่างเดียว สำหรับเหตุการณ์ดังกล่าว สามารถใช้วัสดุชีวภาพได้หลายชนิด: น้ำลาย ปัสสาวะ เลือด น้ำในเยื่อหุ้มปอด ฯลฯ

ในทางกลับกัน การวินิจฉัยนี้ต้องใช้อุปกรณ์ที่ทันสมัยและบุคลากรที่ได้รับการฝึกอบรมมาอย่างเหมาะสม เมื่อเลือกสถาบันทางการแพทย์ ควรเน้นที่สถาบันขนาดใหญ่ที่สามารถซื้ออุปกรณ์ล่าสุดได้ ซึ่งจะส่งผลโดยตรงต่อความเร็วในการถอดรหัสการวิเคราะห์และความแม่นยำ

การวิเคราะห์ PCR คืออะไร?

ข้อมูลทางพันธุกรรมทั้งชุดที่สิ่งมีชีวิตใดๆ มีอยู่ใน DNA กรดนิวคลีอิกที่ระบุประกอบด้วยสารประกอบสี่ชนิด การระบุสิ่งมีชีวิตไม่ใช่เรื่องยาก แต่ละตัวโดยไม่คำนึงถึงพารามิเตอร์ (ไม่ว่าจะเป็นแบคทีเรีย สัตว์ ปลา) มี DNA เฉพาะของตัวเอง

จุลินทรีย์บางชนิดเก็บข้อมูลทางพันธุกรรมไว้ในอาร์เอ็นเอ

ชิ้นส่วนของกรดนิวคลีอิก (RNA และ DNA) สามารถตรวจพบได้โดยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส หรือที่เรียกว่า PCR

หัวใจของการทดสอบที่พิจารณา - การใช้เอนไซม์พิเศษต้องขอบคุณการคัดลอกบางส่วนของ DNA / RNA ของไวรัส จุลินทรีย์ และการติดเชื้ออื่นๆ

แหล่งที่มาของเชื้อโรคเหล่านี้สามารถนำไปใช้ได้จริง วัสดุชีวภาพใด ๆที่นำมาจากบุคคล: น้ำลาย เลือด ปัสสาวะ สารคัดหลั่งจากท่อปัสสาวะหรือช่องคลอด ฯลฯ

เนื่องจากเนื้อหาของกรดนิวคลีอิกในตัวอย่างเลือดและสารชีวภาพอื่นๆ มีน้อยมาก จึงเป็นไปไม่ได้ที่จะระบุโรคเฉพาะโดยใช้วิธีการวิจัยอื่น ที่ ในระหว่าง PCR สามารถเพิ่มระดับของโมเลกุล DNA ได้ซึ่งให้การวินิจฉัยที่เชื่อถือได้ในอนาคต

ช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการใช้อุปกรณ์พิเศษในการวิเคราะห์ นักปั่นจักรยาน . อุปกรณ์นี้ให้ความร้อนและทำให้หลอดทดลองเย็นลงซึ่งวางวัสดุชีวภาพไว้ สภาวะอุณหภูมิที่เพียงพอส่งผลโดยตรงต่อความแม่นยำของผลลัพธ์ที่ได้

เป็นผลให้ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการ PCR ได้รับ อิเล็กโทรโฟแกรมโดยยึดชิ้นส่วนของกรดนิวคลีอิกที่แยกได้

ภาพที่ระบุจะถูกเปรียบเทียบกับฐานข้อมูลบนคอมพิวเตอร์ - และกำหนดประเภทของเชื้อโรค ความเข้มข้นของเชื้อโรคในร่างกาย

สามารถระบุโรคอะไรได้บ้าง?

จากการวิเคราะห์ภายใต้การพิจารณาสามารถระบุพยาธิสภาพต่อไปนี้:

ในปัจจุบันนี้ การทดสอบนี้มักใช้บ่อยมาก อาชญาวิทยาเมื่อจำเป็นต้องระบุว่าใครเป็นเจ้าของวัสดุชีวภาพที่นำมาจากที่เกิดเหตุ

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสยังสามารถใช้เพื่อกำหนด ความเป็นพ่อ.

กฎการรวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัย

เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำที่สุด จะมีการเก็บตัวอย่างทางชีวภาพสำหรับ PCR ดังนี้:

1. เครื่องมือภาชนะสำหรับวัสดุที่จับต้องได้รับการฆ่าเชื้อ ควรใช้อุปกรณ์แบบใช้แล้วทิ้ง
2. ควรเก็บตัวอย่างเลือดในหลอดที่มีสารกันเลือดแข็ง และในกระบวนการสุ่มตัวอย่าง พวกเขาหันไปใช้ระบบสุญญากาศแบบพิเศษ
3. จะต้องทำการสุ่มตัวอย่างวัสดุชีวภาพในห้องควบคุม

สามารถใช้วัสดุต่าง ๆ ในการวินิจฉัย: ทุกอย่างจะขึ้นอยู่กับประเภทของการติดเชื้อ:

• ผ้าเช็ดปาก/แผลที่ปากมดลูก/ท่อปัสสาวะ ปัสสาวะตอนเช้า: เมื่อตรวจหาโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์
• เลือด: เมื่อทดสอบการติดเชื้อ TORCH, HIV, ตับอักเสบ
• น้ำไขสันหลัง: หากสงสัยว่ามีข้อบกพร่องในการทำงานของระบบประสาทส่วนกลาง
• ไม้กวาดคอ/คอหอย: เมื่อตรวจหา cytomegalovirus, mononucleosis
• เสมหะ/ของเหลวในเยื่อหุ้มปอด: หากปอดติดเชื้อ
• ตัวอย่างเนื้อเยื่อรก: เพื่อแยกหรือยืนยันการติดเชื้อในมดลูก

เตรียมจัดส่ง

ก่อนบริจาควัสดุชีวภาพ ผู้ป่วยต้องเตรียม:

1. หากนำวัสดุดังกล่าวออกจากท่อปัสสาวะ, การมีเพศสัมพันธ์และการใช้สารต้านแบคทีเรียเพื่อสุขอนามัยที่ใกล้ชิดเป็นสิ่งต้องห้าม 3 วันก่อนการทดสอบ ก่อนตรวจ 3 ชั่วโมง ต้องงดปัสสาวะ
2. เลือดเพื่อการวิจัยใช้เวลาในตอนเช้าในขณะท้องว่าง
3. สำหรับตรวจปัสสาวะใช้ส่วนแรกหลังการนอนหลับ สำหรับการวิเคราะห์นี้ ผู้ป่วยควรซื้อภาชนะพิเศษที่ร้านขายยาก่อน ขอแนะนำให้ส่งวัสดุชีวภาพที่นำไปยังห้องปฏิบัติการวินิจฉัยภายในสองชั่วโมง
4. ไม้กวาดช่องคลอดจะดีกว่าที่จะใช้เวลาสองสามวันก่อนมีประจำเดือนหรือ 1-2 วันหลังจากเสร็จสิ้น
5. ตัวอย่างน้ำลายควรถอดออกหลังจากล้างอย่างทั่วถึงเท่านั้น (3 ครั้ง) ช่องปากสารละลายทางสรีรวิทยา

ถ้าเป็นไปได้ ตัวอย่างทางชีวภาพที่ถ่ายควรเป็น นำส่งห้องปฏิบัติการทันที.

หากไม่สามารถจัดส่งด่วนได้,วัสดุสามารถจัดเก็บได้ เวลาอันสั้นในที่เย็น (+4…+8 C)

หากต้องการจัดเก็บข้อมูลระยะยาววัสดุชีวภาพบางชนิดสามารถแช่แข็งได้เพียงครั้งเดียวเท่านั้น

ภาชนะต้องมาพร้อม การแนะนำของแพทย์สำหรับ PCR.

ระยะเวลาของการวินิจฉัย PCR

ระยะเวลาในการจัดทำผลการทดสอบประเภทที่พิจารณาจะพิจารณาจากความสามารถของห้องปฏิบัติการที่จะดำเนินการ

บ่อยครั้ง กำลังจะถอดรหัส 1-2 วัน. อย่างไรก็ตาม ในสถานการณ์ฉุกเฉิน PCR สามารถทำได้ภายในไม่กี่ชั่วโมง

ตัวชี้วัดและการตีความผลลัพธ์ PCR

ในการใช้เทคนิคการตรวจ PCR เชิงคุณภาพ สามารถหาคำตอบที่เป็นไปได้สองข้อ:

• เชิงบวก.บ่งชี้ว่า DNA / RNA ต่างประเทศมีอยู่ในร่างกายของผู้ป่วย ซึ่งหมายความว่ามีการติดเชื้อเกิดขึ้น หากผู้ป่วยไม่มีข้อร้องเรียนใด ๆ โดยทั่วไปแล้วเขารู้สึกดีและผลการวินิจฉัย PCR เป็นบวก แสดงว่าระยะเริ่มต้นของโรค ในสถานการณ์เช่นนี้ การรักษาจะใช้เวลาและเงินไม่มาก ในบางกรณีที่หายากมาก ผลลัพธ์อาจเป็นผลบวกที่ผิดพลาด: หากกฎของ antisepsis ถูกละเมิดในระหว่างการสุ่มตัวอย่างวัสดุชีวภาพ
• เชิงลบ.หมายถึงไม่มีตัวแทนไวรัสที่ต้องการในตัวอย่างที่ถ่าย ผลลบที่เป็นเท็จอาจเป็นผลมาจากปัจจัยมนุษย์ (ประการแรกการละเมิดกฎสำหรับการจัดเก็บ biosample การรวบรวมที่ไม่ถูกต้อง)

การหาปริมาณของวัสดุชีวภาพที่ศึกษาทำให้สามารถสรุปเกี่ยวกับระดับภาระที่ไวรัส/แบคทีเรียมีในร่างกายได้

ในระหว่างการถอดรหัสจะมีการกำหนดจำนวนของ RNA หรือ DNA ต่างประเทศซึ่งมีความเข้มข้นใน 1 มล. เลือด (IU/มล.)

ด้วยเทคนิคนี้ แพทย์สามารถระบุระยะและรูปแบบของโรค กำหนดการรักษาที่เพียงพอ และกำหนดระยะเวลาของโรคได้

วิเคราะห์ซ้ำมักจะกำหนด 1 เดือนหลังการรักษา

การวินิจฉัย PCR - มันคืออะไร? สาระสำคัญของปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสอยู่ที่การใช้เครื่องหมายชนิดพิเศษในการศึกษาวัสดุทางชีววิทยา ซึ่งจะวิเคราะห์ DNA ของเชื้อโรคได้อย่างรวดเร็ว ในนรีเวชวิทยา มีวิธีการวิเคราะห์ PCR ในสตรีที่แตกต่างกัน ขึ้นอยู่กับวัสดุที่กำลังศึกษา (เลือด ปัสสาวะ รอยเปื้อน ฯลฯ) หลังจากประมวลผลข้อมูลแล้ว จะตรวจพบชนิดของเชื้อโรค (เรียกว่า "การวิเคราะห์เชิงคุณภาพ PCR") และ/หรือความเข้มข้นของเชื้อโรค - การศึกษาประเภทนี้เรียกว่า "การวิเคราะห์เชิงปริมาณ PCR"

การส่งการวิเคราะห์โดย PCR ช่วยให้คุณตรวจหาเชื้อโรคของพยาธิวิทยาติดเชื้อได้อย่างรวดเร็ว เมื่อไม่สามารถทำเช่นนี้กับการวิเคราะห์อื่นๆ (ภูมิคุ้มกันวิทยา แบคทีเรียวิทยา จุลทรรศน์) ในยุคปัจจุบัน การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ PCR มีประสิทธิภาพสูงสุดและ วิธีที่ดีที่สุดการตรวจจับ DNA ของจุลินทรีย์และไวรัส การทดสอบนี้ทำให้นรีแพทย์และแพทย์คนอื่นๆ ของคลินิกไม่เพียงแต่ระบุสาเหตุของโรคในผู้หญิงและผู้ชายเท่านั้น แต่ยังสามารถควบคุมกระบวนการเพื่อประเมินผลการรักษาได้อย่างถูกต้อง

ราคาสำหรับการวินิจฉัย PCR

PCR แสดงอะไร

การวิเคราะห์ PCR เชิงคุณภาพบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อโดยตรงในร่างกายมนุษย์หรือสัตว์ คุณสามารถผ่านการทดสอบการโลคัลไลเซชันเกือบทั้งหมดได้ (เช่น อวัยวะเพศ ท่อปัสสาวะ คอหอย ฯลฯ) และการตรวจเลือดด้วย PCR โดยการตรวจหรือขูดในนรีเวชวิทยา พวกเขาจะตรวจหาหนองในเทียม ยูเรีย และมัยโคพลาสมา ไวรัสเริม HPV และจุลินทรีย์อื่นๆ ผลการวิเคราะห์ดีเอ็นเอจะมอบให้กับผู้ป่วยโดยสรุปห้องปฏิบัติการ "ตรวจพบ" หรือ "ไม่พบ" ในกรณีของการตรวจเลือด ช่วยให้คุณสามารถระบุเอชไอวี ไวรัสตับอักเสบ เริม ไซโตเมกาโลไวรัส และจุลินทรีย์อื่นๆ ได้ในระยะแรก และในบางกรณี เพื่อระบุจีโนไทป์ของพวกมันและแสดงจำนวน

การตรวจ PCR เชิงปริมาณ
การศึกษานี้ไม่เพียงแต่ช่วยให้ระบุสารพันธุกรรมที่ต้องการได้อย่างรวดเร็ว แต่ยังแสดงความเข้มข้นของ DNA ของพวกมันด้วย (วิธี PCR เชิงปริมาณ) การระบุชนิดและจำนวนของเชื้อโรคเป็นสิ่งสำคัญในการตัดสินใจว่าจะสั่งการรักษาหรือไม่ โดยเฉพาะอย่างยิ่งถ้า ตัวอย่างเช่น มัยโคพลาสมา (การหาปริมาณดีเอ็นเอ) การพิมพ์ยูเรียพลาสมา (การหาปริมาณดีเอ็นเอ) หรือที่สำคัญที่สุดคือ จีโนไทป์และการหาปริมาณของปริมาณไวรัสสามารถ จะทำในการวิเคราะห์การติดเชื้อ HPV

ผลลัพธ์ PCR

จากทั้งหมดที่กล่าวมา เป็นที่ชัดเจนว่าการวิเคราะห์ PCR คืออะไรและข้อดีของการทดสอบนี้ในนรีเวชวิทยาคืออะไร ความแตกต่างที่สำคัญอีกประการหนึ่งของการวินิจฉัยนี้คือการถอดรหัสผลลัพธ์ที่สามารถเข้าถึงได้และสะดวกสำหรับผู้ที่ไม่ใช่มืออาชีพ เมื่อพิจารณาถึงจำนวนการวิเคราะห์ PCR ในคลินิก ตลอดจนระยะเวลาของข้อสรุป (โดยปกติแล้วห้องปฏิบัติการจะออกข้อมูลภายใน 1-2 วัน) วิธีการวินิจฉัยนี้จึงกลายเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดในการระบุการติดเชื้อทางนรีเวชที่สำคัญทั้งหมดและการติดเชื้ออื่นๆ

ห้องปฏิบัติการด้วยวิธีเชิงคุณภาพสำหรับการวิจัยดีเอ็นเอเกี่ยวกับรอยเปื้อนของเพศหญิงและเพศชาย สรุปได้ 2 ประเภทคือ

1. "PCR negative" - ​​​​ไม่พบเชื้อโรคในวัสดุทดสอบและ
2. "PCR positive" - ​​พบ RNA หรือ DNA ของจุลินทรีย์หรือไวรัสในการทดสอบ

PCR ในนรีเวชวิทยา

ข้อบ่งชี้ในการผ่านการทดสอบเหล่านี้ในผู้หญิงมีดังนี้:

• ความสงสัยในความเป็นไปได้ของการติดเชื้อโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์
• แบบสำรวจที่ไม่เปิดเผยชื่อ;
• การปรากฏตัวของสารคัดหลั่งจากระบบสืบพันธุ์, อาการคัน;
• ปวดในช่องท้องส่วนล่าง;
• รู้สึกไม่สบายเมื่อปัสสาวะ;
• ปวดเมื่อมีเพศสัมพันธ์;
• เม็ดเลือดขาวสูงในการวิเคราะห์สเมียร์สำหรับพืช
• การปรากฏตัวของการกัดเซาะของปากมดลูก;
• การวางแผนการตั้งครรภ์
• ปัญหาเกี่ยวกับการตั้งครรภ์และคลอดบุตร
• การเตรียมการผ่าตัดทางนรีเวช IVF;
• เพื่อวัตถุประสงค์ในการป้องกัน

ที่ไหนดีที่สุดที่จะทำการทดสอบ PCR ในมอสโก
การวินิจฉัยทางนรีเวชวิทยาประเภทนี้หมายถึงวิธีการที่ทันสมัยและมีเทคโนโลยีสูง ควรทำการทดสอบ PCR สำหรับการติดเชื้อในคลินิกที่มีทุกสิ่งที่จำเป็นเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่สมบูรณ์ ในศูนย์การแพทย์ของเรา นรีแพทย์ผู้ทรงคุณวุฒิและมีประสบการณ์จะนำวัสดุไป (ไม่ใช่พนักงานทั่วไปในห้องทรีตเมนต์) ใช้เครื่องมือแบบใช้แล้วทิ้งและวัสดุในห้องปฏิบัติการพิเศษ และตัวอย่างที่ได้รับจากผู้ป่วยจะถูกส่งไปยังที่ทำงานทุกวัน วิธีนี้ไม่เพียงแต่จะได้ผลลัพธ์ PCR อย่างรวดเร็วเท่านั้น แต่ยังช่วยให้มั่นใจในความน่าเชื่อถืออีกด้วย ทางเลือก - ไม่เปิดเผยตัวตนของแบบสำรวจให้สมบูรณ์

PCR ราคาเท่าไหร่?
บริการนี้มีให้โดยหลายคน สถาบันทางการแพทย์เมืองหลวง. ค่าใช้จ่ายขึ้นอยู่กับปัจจัยหลายประการ ตั้งแต่สถานที่ตั้งไปจนถึงนโยบายการกำหนดราคาภายใน อย่างไรก็ตาม มีปัจจัยวัตถุประสงค์ที่กำหนดตัวเลขขั้นต่ำโดยเฉลี่ย ซึ่งด้านล่างนี้ไม่สามารถให้บริการที่มีคุณภาพและเชื่อถือได้เนื่องจากปัจจัยที่กล่าวถึง ราคาของการวินิจฉัย PCR ในคลินิกมอสโกสำหรับการติดเชื้อบางอย่างโดยเฉลี่ยมีดังนี้:

• การวิเคราะห์เชิงคุณภาพของ PCR smear - 400 - 500 rubles;
• การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ PCR smear - จาก 600 rubles (1 หน่วย);
• การวินิจฉัยการขูด RNA - จาก 1,000 รูเบิล (1 หน่วย);
• การตรวจเลือด PCR เชิงคุณภาพ (เช่นสำหรับเริม, HPV, ไวรัส Epstein-Barr, cytomegalovirus) - 450 - 550 rubles, เชิงปริมาณ - จาก 2,000 rubles;
• คุณภาพของ DNA ของ HIV (ปฏิเสธ / ยืนยันการปรากฏตัวของ HIV ในช่วงพรีคลินิก) - จาก 2,000 rubles, RNA เชิงปริมาณ - จาก 7,000 rubles, ความต้านทาน - จาก 14,000 rubles

การเตรียมตัวสำหรับ PCR

เพื่อให้ได้ผลการวิจัยที่ถูกต้องและเชื่อถือได้ เด็กหญิงและสตรีควรปฏิบัติตามกฎเกณฑ์บางประการก่อนไปตรวจหาเชื้อ:

1-2 วันก่อนเข้ารับการตรวจที่คลินิกปฏิเสธการมีเพศสัมพันธ์
- งดการปัสสาวะ 1.5 - 2 ชั่วโมงก่อนการละเลง
- ดำเนินการสุขอนามัยของอวัยวะเพศภายนอกด้วยน้ำเปล่าโดยไม่ต้องใช้ผงซักฟอกไม่รวมการล้างข้อมูล
- ไม่รวมการใช้เม็ดยาเหน็บทางช่องคลอด
- อย่าทำการทดสอบ PCR ระหว่างมีประจำเดือน
- เป็นสาวพรหมจารีก่อนตรวจเตือนสูตินรีแพทย์ล่วงหน้าเกี่ยวกับเรื่องนี้

วิธีการทดสอบ PCR

การผ่าน PCR ในคลินิกของเรา รวมถึงการไม่เปิดเผยตัวตนนั้นค่อนข้างง่าย ต่อไป เราจะพูดถึงวิธีที่ PCR ถูกนำมาจากผู้หญิงและผู้ชาย และจากที่ซึ่งการศึกษานี้มีข้อมูลมากที่สุด

ในกรณีของผู้หญิง การวิเคราะห์จะดำเนินการโดยนรีแพทย์ โดยปกติจะเกิดขึ้นในการนัดหมายครั้งแรกกับแพทย์หรือเมื่อคุณเพิ่งเข้ารับการตรวจการติดเชื้อโดยไม่ต้องปรึกษาหารือล่วงหน้า ได้ทุกอย่างตามต้องการ คุณพูดความปรารถนาของคุณสำหรับการติดเชื้อที่คุณต้องการทดสอบและหลังจากนั้นขั้นตอนการรับวัสดุเริ่มต้นโดยตรง ผู้ป่วยถอดเสื้อผ้าใต้เอว ตั้งอยู่บนเก้าอี้ เมื่อแยกริมฝีปากเล็กแล้วแพทย์จะสอดถ่างที่มีขนาดเหมาะสมเข้าไปในช่องคลอด สูตินรีแพทย์ใช้ PCR จากผู้หญิง โดยปกติแล้วจะมาจากปากมดลูกและท่อปัสสาวะ ในกรณีหลังก่อนที่จะใช้โพรบจะทำการนวดระยะสั้นของท่อปัสสาวะโดยใช้นิ้วสอดเข้าไปในช่องคลอด ในกรณีที่เด็กหญิงวัยรุ่นหรือสาวพรหมจารีทำการวิเคราะห์ PCR จะไม่ใช้กระจกเงา และตัวอย่างสารคัดหลั่งจะถูกนำผ่านรูในเยื่อพรหมจารีหรือส่วนหน้าของช่องคลอด วัสดุที่ได้จะถูกวางในหลอดทดลองที่ปิดสนิทด้วยสื่อพิเศษและส่งไปยังห้องปฏิบัติการ

การวิเคราะห์นี้ในผู้ชายไม่ใช่เรื่องยากโดยเฉพาะ โพรบถูกสอดเข้าไปในท่อปัสสาวะที่ความลึก 3-4 ซม. หมุนตามเข็มนาฬิกาและทวนเข็มนาฬิกาหลายครั้ง วัสดุนี้ยังอยู่ในหลอดทดลองสำหรับการวินิจฉัยเพิ่มเติม