46. ​​Ćelijske kulture i njihovi tipovi. Sistem u kojem ćelije, tkiva ili organi uklonjeni iz tijela zadržavaju svoju održivost najmanje 24 sata. Preživljavanje: u kojem ćelije samo zadržavaju svoju inherentnu životnu aktivnost bez reprodukcije. Uzgoj: zadržavaju svoju inherentnu životnu aktivnost i sposobni su za proliferaciju. Prema prirodi rasta dijele se u 3 grupe: suspenzija; plazma (kulture fiksiranih komada tkiva); jednoslojni. Jednoslojne dijele se u 4 grupe: primarno tripsinizirane; subkulture; polupreskok i preklopni. Suspenzija: rastu u obliku suspenzije, ćelije se razmnožavaju posebnim medijumom uz stalno miješanje pomoću valjaka. Ćelije rastu po cijeloj površini dušeka. Veliki broj ćelija za vakcine. plazma: komadi tkiva fiksirani plazmom, ovo je kultura tkiva. Dobiva se fiksiranjem komada tkiva na stakleno virološko staklo, zatim dodavanjem podloge u obliku jame i uzgojem; u ovom slučaju se bilježi rast ćelija duž periferije komada tkiva. Koristi se za dobijanje komada tkanine. Jednoslojni: Za označavanje virusa. Dobija se iz tkiva ili organa tretiranjem tripsinom. Od primarnih se subkulture dobijaju kalemljenjem. Dalje, polutransplantirano višestrukim transplantacijama. Imaju diploidni skup hromozoma. Može preživjeti diploidno ovisno o starosti ili tkivu iz kojeg je dobivena ćelijska kultura. Ako je embrion do 80 dana. Za odraslu osobu – ne više od 25 transplantacija. Ne postoji više od 5 starih Transplantiranih ćelija koje su kancerogene. Traju beskonačan broj puta. To su transformirane ćelije tumora raka. Hela je najpoznatija kontinuirana ćelijska kultura od 1956. godine. Ova kultura je prisutna u svim laboratorijama u svijetu. Prilagođen je mnogim patogenima. Prvorođene životinje imaju niz prednosti: ne umiru; veća stopa rasta; svi su genetski homogeni. U laboptoriji se održavaju ponovnim zasijavanjem iz jedne posude u drugu.

59. CPD. Ovo je metoda za indikaciju virusa u ćelijskoj kulturi. CPD se odnosi na sve promjene u stanicama u ćelijskoj kulturi pod utjecajem virusa koji se u njima razmnožava. Koristim malo uvećanje kada gledam gornji sloj dušeka. Uporedite inficirane ćelije sa neinficiranim. Razlike se mogu proširiti kroz cijeli monosloj ili samo u dijelovima. Oni se vrednuju u kristama ili bodovima. Dakle, ako je cijeli monopol CPU-a promijenjen, procjenjuje se na 4 ukrštanja; ako ¾ - za 3 kr; ½ po 2 kr; ¼ - za 1 krst. Oblici CPD zavise od bioloških svojstava virusa, tipa ćelija, doze infekcije, uslova uzgoja itd. Neki virusi pokazuju CPD nakon 2-3 dana, drugi nakon 1-2. 3 oblika CPU-a: fragmentacija– uništavanje ćelija u zasebne fragmente, koji se odvajaju od stakla i prelaze u kulturni fluid. Zaokruživanje– ćelije gube sposobnost vezivanja za staklo, poprimaju sferni oblik, odvajaju se i slobodno lebde tamo gde umiru. Formacija Symplasta– raspadanje staničnih membrana, uslijed čega se citoplazme susjednih stanica spajaju, čineći jedinstvenu cjelinu u kojoj se nalaze jezgra stanica. Takve formacije se nazivaju simplasti - divovske polifagne stanice. Potrebno je izvršiti najmanje 3 slijepa prolaza kako bi se ocijenilo prisustvo virusa u test materijalu. Hemadsopcija je veza crvenih krvnih zrnaca sa površinom ćelija zaraženih virusom.

51. Proračun titra virusa prema Reedu i Menchu. Titracija virusa sa statistički procijenjenim učinkom uz izračunavanje titra po čitanju i menšu. Za ovu metodu titracije može se koristiti bilo koji biološki model, ali ovaj model mora biti osjetljiv na virus koji se titrira (ćelijske kulture, embriji, laboratorijske životinje). Prema infektivnom učinku inficiranih bioloških modela dijele se na sljedeće: klinički prepoznate; prema patomorfološkim promjenama; nakon smrti modela; akumulacijom hemaglutinina. Rezultati rada zavise od doze virusa. Utvrđeno je da je doza virusa koja uzrokuje 50 posto infektivnog efekta najmanje osjetljiva na fluktuacije i da je najodrediva od svih mogućih doza. Titar se izražava u efektivnim dozama od 50 posto. Ovo je ED od 50. Ovisno o korištenom biološkom modelu i postignutom efektu, doza od 50 posto može se izraziti u sljedećim jedinicama: LD 50 – ID 50 ELD 50 EID 50 TsPD 50– ovo je 50 postotna citopatogena doza određena u ćelijskim kulturama pomoću CPD-a. Ako u zaraženim sistemima ne uočimo 50 posto efekta koji je ID 50, tada se titar izračunava čitanjem i izbornikom: lg LD 50 = lg ECD - (% godina ECD - 50%) / (% godina ECD - % godina ECD) SVE OVO MNOŽENO SA lg višestrukim vremenima

36. Pravila i radno vrijeme u virološkoj laboratoriji. Svi učenici su obučeni i obučeni u sigurnom tr. Ulazak u proizvodne prostorije neovlašćenim licima, kao i bez mantila i zamjenske obuće, zabranjen je. Zabranjeno je izlaziti van laboratorije sa ogrtačem i kapom. Pušenje, jedenje u laboratoriji i čuvanje hrane. Sav materijal koji ulazi u laboratorij mora se smatrati zaraženim. Na kraju rada, radno mjesto se sređuje i temeljno deidentificira. Označavanje posuđa koje sadrži infektivni materijal. Ruke koje nose rukavice se peru u tegli sa 5-postotnim rastvorom hloramida, zatim se rukavice skidaju i dezinfikuju po drugi put, dezinfikuju i peru. ra Laboratorijski rad virologa izgrađen je na tri glavna principa: spriječiti infekciju zaposlenih ili ljudi koji rade sa materijalima koji sadrže virus. Sprečiti kontaminaciju materijala (alati, pribor su sterilni) čišćenjem prostorija dezinfekcionim rastvorom + ultraljubičastim lampama. Spriječite iznošenje virusa izvan laboratorije (sa zrakom, priborom, čvrstim i tekućim materijalom). Pipete i čaše se moraju odložiti u sterilizator. Epruvete sa virusima, maramice - u autoklav. Ne otvarajte centrifugu dok se ne zaustavi. Potrebno je samo da uklonite zrak iz šprica pomoću pamučnog štapića sa 75 posto alkohola. Zabranjeno je provetravati prostoriju pomoću ventilacionog sistema sa filterom.

37. Sigurnosne mjere sa materijalom koji sadrži virus. Spriječite širenje virusa u vanjskom okruženju. Spriječiti kontaminaciju (kontaminaciju) materijala koji sadrži virus stranom mikroflorom. Osigurajte ličnu sigurnost. Za ispunjavanje ovih zahtjeva neophodna su sljedeća pravila rada: budite pažljivi i uredni; biti samo u ogrtaču i presvući se u garderobi; raditi samo sa zakopčanim manžetnama, kapom i maskom od gaze; strogo održavati čistoću i red u laboratoriji; na radnoj površini ne bi trebalo biti stranih predmeta; Zabranjeno je pušiti i jesti. Koristite sterilne instrumente i pribor. Radite sa posudama u blizini plamena gorionika. Ne stavljajte prste u usta. Korišteni uređaji u sterilizatoru. Sakupite iskorištene pipete u posudu s otopinom za dezinfekciju. Čvrsti ili tekući otpad (vatu) prikupiti u posebne posude za naknadnu dezinfekciju. Ne sipajte otpad u umivaonike ili toalete.

33. Mehanizam antivirusnog djelovanja interferona. Interferon nema direktan učinak na virus. Utječe samo na ćeliju aktiviranjem sinteze određenih ćelijskih enzima. Konkretno, enzim protein kinaza i 2,5 oligoasintetaza. Informacije o sintezi ovih enzima takođe se nalaze u određenim regionima gena ćelije i takođe su u represivnom stanju. Pod uticajem vazduha dolazi do derepresije gena odgovornih za sintezu protein kinaze i 2,5 iligoAs sintetaze. I njihova se sinteza naglo povećava. 1) pod zrakom protein kinaze, inicijacijski faktor se fosforira, što osigurava vezivanje virusne glasničke RNK za ribozom. Dakle, virusna glasnička RNK ne može kontaktirati ribosomski aparat ćelije, odnosno početak translacije. I na kraju, sinteza virusnih proteina i enzima postaje nemoguća. 2) pod uticajem interferona aktivira se sinteza 2,5 oligoasintetaze, koja katalizuje sintezu 2,5 oligoadenilne kiseline u ćeliji. Ova kiselina mijenja djelovanje ćelijskih nukleaza kako bi uništila virusne glasničke RNK. Dakle, pod uticajem interferona dolazi do: blokiranja translacije virusne glasničke RNK; uništavanje virusnih glasnih RNK. Inhibicijski učinak interferona na reprodukciju stanica: interferon u koncentracijama od 0 do 1000 jedinica po ml potiskuje reprodukciju širokog spektra stanica u bilo kojem tkivu. Interferon reguliše rast mnogih tipova ćelija uključujući primarne ćelijske kulture i tumorske ćelije. Zasniva se na supresiji sinteze određenih ćelijskih proteina i sintezi novih proteina interferonom. Inter povećava aktivnost ubica T-limfocita. U velikim dozama inhibiraju stvaranje antitijela. Male doze, naprotiv, stimulišu stvaranje antitijela. Kriling – ćelije tretirane malim dozama interfa proizvode više interfa nego netretirane ćelije. Prevelike doze - suprotan proces.

35. Vrste interakcije između virusa i ćelije. Produktivno i neuspešno. Produktivno se dijeli na litičko i latentno. Produktivno: Ovo je vrsta interakcije u kojoj se nova generacija viriona formira u ćeliji. Ako stanica brzo umre nakon što je stekla novi virion, onda je to produktivan litički put interakcije između virusa i stanice. Ako ćelija u kojoj virus raste dugo vremena zadržava svoju održivost (pupanjem), onda je to proizvod latentnog tipa interakcije. Neuspješno: Ovaj tip je obostran kada se reprodukcija viriona zaustavi u bilo kojoj fazi, virion se ne razvija. Kao rezultat interakcije virusa sa ćelijom, u ćeliji se mogu pojaviti sljedeće promjene: degeneracija ćelija– ćelije se prvo transformišu u nepravilan oblik, zatim postaju zaobljene, pojavljuje se granularnost u citoplazmi, zatim nuklearna fragmentacija pa ćelijska smrt. Takve promjene se nazivaju CPD. U krstovima: 4 krsta – 100% efikasnost. Formiranje simplasta– višenuklearne ćelije. Formiranje inkluzijskih tijela– sadrži intranuklearne i plazmatske mb, RNK ili DNK. Transformacija ćelije– onkogeni virusi (RNA retrovirusi). Reprodukcija onkogenih virusa u ćeliji nije praćena CPD-om. Ćelija stalno proizvodi virus. Sinteza interferona.

4. Otpornost virusa na fizičko-hemijske faktore. Otpornost životinjskih virusa je relativno dobro proučena kada su izloženi vanjskim faktorima: temperaturi, zračenju, ultraljubičastom zračenju, ultrazvuku, pH, formaldehidu, fenolu itd. Za zaštitu od ovih utjecaja virioni imaju proteinsku ljusku. Različita struktura i hemijski sastav proteinskih ljuski određuje različitu stabilnost virusa. Ovisno o ovim karakteristikama, isti faktor može potpuno uništiti neke virione, a druge ne. Na primjer, organska otapala: oni virioni u čijim ljuskama nema lipida otporni su na te tvari, a oni koji sadrže lipide brzo se uništavaju. Inaktivacija virusa znači potpuni ili djelomični gubitak njihove biološke aktivnosti, koji nastaje kao rezultat djelovanja fizičkih i kemijskih faktora. Promjenom virusne nukleinske kiseline i proteina dolazi do potpune inaktivacije, odnosno gubitka svih bioloških svojstava virusa – gubi samo svoja infektivna svojstva i zadržava svoju imunogenost. Priroda i opseg agensa kemijske i fizičke prirode koji djeluju na virus ovisi o prirodi faktora inaktivacije, o dozi, dugotrajno, o vrsti virusa. Kada je virus inaktiviran, može doći do cijepanja proteina ljuske, nakon čega slijedi njegova dezintegracija u zasebne jedinice, ili zbijanje proteina uz očuvanje opšta strukturaškoljke. Cijepanje se uočava pod djelovanjem kiselog i alkalnog okruženja uz dugotrajno i nisko zagrijavanje. Koagulacija i zbijanje dolazi do izlaganja formaldehidu, visokoj temperaturi ili fenolu. Zavisi od koncentracije i trajanja. Dakle, u nekim slučajevima, koagulacija proteina je praćena uništavanjem nuklearnih kiselina i virus doživljava nepovratan gubitak infektivnosti. U drugim slučajevima, sposobnost virusa da se razmnožava je očuvana. Konzervirano sa glicerinom.

60. PCR. Princip metode: identificira se gen specifičan za dati virus - dio molekule DNK koji nosi informacije za sintezu jednog proteina. Ovaj gen se zatim identifikuje u test materijalu pomoću PCR-a. Ova reakcija omogućava formiranje dodatnih kopija gena – amplifikaciju dijela DNK u epruveti. Ovisno o svrsi istraživanja, može se identificirati vrsta ili rod mo. Suština PCR-a: molekul DNK se zagrijava na 90-94 stepena. Što dovodi do razaranja vodoničnih veza između azotnih baza dvostrukog heliksa i zatim ohlađenog na 52 g u prisustvu enzima DNK polimiraze. Naknadno povećanje brzine dovodi do sinteze novog molekula DNK – komplementarnog šablona. Ovaj postupak se ponavlja mnogo puta, što rezultira većim fragmentima. Indikacija se provodi pomoću elektroforeze ili označene DNK sonde. Glavne komponente: DNK polimiraza je termostabilna; oligonukleotid od 20 nukleotida; trifosfati; pojačalo, stakleno posuđe i reagensi za elektroforezu u agaroznom gelu. Podešavanje: dobijanje DNK uzorka. Da bi se to postiglo, materijal koji se proučava se suspendira u puferu ili destilovanoj vodi. Dodajte natrijum OH i držite 7 minuta. Smjesa je neutralizirana. Lizat se centifugira 10 minuta da se sedimentiraju velike čestice. Supernatant se koristi za PCR. PCR je amplifikacija datog gena fragmenta DNK. Zatim se topi u termocikleru 3 sata. Indikacija amplifikacije - uzorak se podvrgava elektroforezi u agaroznom gelu da se odvoji DNK. Nakon 30 minuta, agaroza se polimizira u aparatu i formiraju se rupe u agarozi. Uzima se 10 μl mješavine i pomiješa se sa 5 μl boje. Smjesa se dodaje u jažice i vrši se elektroforeza 40 minuta. Ploča se ukloni i boji u rastvor bromida 10 minuta. Agaroza se zatim stavlja na transiluminator i slikaju se rezultirajući uzorci traka. Trake koje otkriva ultraljubičasto zračenje su fragmenti DNK.

49. Metoda infekcije ćelijskih kultura. Indikacija virusa u ćelijskim kulturama. Infekcija: u tu svrhu odabiru se epruvete s kontinuiranim monoslojem ćelija. Podloga za rast se ocijedi i ćelije se isperu nekoliko puta sa Hankovom otopinom. U svaku epruvetu se dodaje 0,2 - 0,1 ml virusnog materijala i protresanjem se ravnomerno raspoređuje po celom sloju ćelija. U ovom obliku, epruvete se ostavljaju 1 do 2 sata na 22 ili 37 stepeni radi adsorpcije virusa na površini ćelija. Zatim se virusni materijal ukloni iz epruveta i medij za održavanje se ulije u epruvetu (1-2 ml). Nakon izolacije virusa, monosloj ćelija se 2 puta ispere Hankovom otopinom, a zatim se sipa podloga za podršku. Indikacija: prema CPD; RGad; formiranjem plaka; intracelularne inkluzije; REEF;

elektronska mikroskopija. 54. RTGA. RGA RTGA: esencija – kada se virus pomiješa sa posebnim serumom, virus gubi svoja hemaglutinirajuća svojstva. Ciljevi – identifikacija izolovanog virusa; otkrivanje antitijela u test serumu i njihov titar. Komponente – za direktnu serovarijantu: materijal koji sadrži virus, specifični serum, 1% suspenzija crvenih krvnih zrnaca, fiziološki rastvor za razrjeđivanje. Za retrospektivno - test serum, standardni antigen u određenoj dozi od 4 GAE (titar razblaženja virusa) 4 GAE - 1:32.Šema – svakom razblaženju seruma dodati jednaku zapreminu standardnog antigena (virusa) u dozi od 4 HAE. Kontaktirajte 30 minuta na sobnoj temp. Dodajte jednaku zapreminu suspenzije crvenih krvnih zrnaca u svaku jažicu sa razblaženjima seruma i konstantnom dozom virusa na 4 ha. Kontaktirajte 30-60 min na sobnoj temp. Računovodstvo reakcije se odvijaju u kristama. ako je plus, onda nema aglutinacije, ako je minuta, onda je hemaglutinacija.Titar antitijela u test serumu je maksimalno razrjeđenje seruma koje u potpunosti odlaže aglutinaciju crvenih krvnih zrnaca. RGA:

Suština: u adsorpciji virusa na površini crvenih krvnih zrnaca, što dovodi do lijepljenja. Namjena: indikacija; za titraciju virusa u haenu. Komponente: virus; 0,5 suspenzija crvenih krvnih zrnaca; slani rastvor za pripremu. Post shema: pripremiti dvostruko razrjeđenje virusa; dodati jednaku zapreminu 0,5% suspenzije crvenih krvnih zrnaca svakom razvoju virusa; kontakt 30-60 minuta na sobnoj temperaturi. Računovodstvo: u kristama. 4 kriste – 100% aglutinacija. 3 krista - 75% . 1 ukrštanje – aglutinacija. 1 haen je maksimalno razrjeđenje virusa koje može uzrokovati aglutinaciju 50% crvenih krvnih stanica. Suština: kada se antigen + označeni serum veže, enzim razgrađuje supstrat. Formira se kompleks antigen+konjugat koji formira obojeni proizvod reakcije, procijenjen pod svjetlosnim mikroskopom ili vizualno. Svrha: identifikacija. Komponente: virusni soda materijal, konjugat, supstrat. Šema postavljanja: ćelijska kulitra se fiksira ohlađenim acetonom. Suše se i na njih se nanosi konjugat. Inkubirajte 1-2 sata na temperaturi od 37 stepeni u vlažnoj komori. Isperite fiziološkim rastvorom, isperite destilovanom vodom i osušite. Na nju se nanosi nekoliko kapi rastvora supstrata, inkubira 5-10 minuta, zatim se ispere u fiziološkom rastvoru i ispere tankom vodom. Računovodstvo: u ovom slučaju, odnosno u prisustvu antigena, nakon primene konjugata, formira se kompleks antigen plus antitelo obeležen enzimom. Nakon nanošenja supstrata, on se razgrađuje djelovanjem enzima, formirajući obojeni proizvod jasno vidljiv u svjetlosnom mikroskopu.

56. RSK. Suština: vezivanje komplimenta za kompleks antigen plus antitijelo. Odsustvo slobodnog komplimenta u ovom sistemu se ocenjuje po zadržavanju hemolizina u indikatorskom sistemu. Ciljevi: identifikacija; otkrivanje antitijela i njihovog titra u serumu krvi. Komponente: 2 sistema – 1 (materijal koji sadrži virus; specifični serum;) (test serum; standardni antigen). 2) hemolitički sistem (indikator) - 2-3% suspenzije eritrocita ovaca je antigen; hemolizin (hemolitički serum) je antitijelo. Antitela odgovaraju antigenu. I kompliment za samo 1 reakciju: ako je prvi, onda će doći do kašnjenja u hemolizi kada kompliment stupi u kontakt sa sistemom koji se proučava. Ako se u drugom, tada crvena krvna zrnca liziraju, doći će do potpune hemolize. Šema podešavanja: reakcija se prvo izvodi u sistemu koji se proučava, a zatim se indikatorski sistem dodaje u istu epruvetu. Računovodstvo: pozitivan RSC – odložena hemoliza. Negativno – potpuna hemoliza.

7. Virusni proteini. Sastoje se od aminokiselina. Sastav virusnog proteina zavisi od redosleda smenjivanja aminokiselina, ovaj red je određen genetskim informacijama sadržanim u virusnom genomu. Virusni proteini se dijele na strukturne i nestrukturne. Strukturni proteini su dio zrelih viriona. Nestrukturni b nisu uključeni u zrele virione, ali su obavezni u određenim fazama reprodukcije. StrukturnoNestrukturni

8. Virusni enzimi. Oni su proteinske prirode. Oni se mogu direktno povezati s virionom, ali nisu povezani - nisu strukturni. u DNK Za RNK: DNK polimiraza zavisna od RNK - nije prisutna u ćeliji, potrebna je za "-" koja sadrži RNK i DNK, koja u vir porodici retroviridae sadrži enzim koji transducira virusni genom naziva se RNK-zavisna DNK polimiraza. Ovaj enzim ima nazive: revertaza, reverzna transkriptaza. Enzimi uključeni u stvaranje virusnih proteina: proteaze, protein kenaze.

52. RN.esencija: Kada virus stupi u interakciju sa specifičnim serumom, virus gubi svoja infektivna svojstva, sposobnost razmnožavanja u stanicama. Ciljevi: identifikacija izolovanog virusa, otkrivanje antitijela u krvnom serumu i titra antitijela. Komponente: materijal koji sadrži virus, specifični serum, biološki model. Ako je retrospektivno: test krvi serum, standardni antigen, biološki model. Opća shema proizvodnje: mešati antigen i antitelo, kontakt 30-40 minuta, maksimalno 2 sata na temperaturi od 37-38 stepeni; mješavina antigena i antitijela se koristi za inficiranje biološkog modela; posmatranje i računovodstvo. računovodstvo: pozitivan pH znači živ, negativan pH znači mrtav.

53. RDP.esencija: isti antigen i antitijelo smješteni na istoj udaljenosti jedno od drugog u agar gelu difundiraju jedan prema drugom, formirajući talog u obliku bijele pruge na mjestu susreta. Ciljevi: identifikacija izolovanog virusa, detekcija antitijela u test serumu. Komponente: materijal koji sadrži virus, specifični serum, agar gel. Za retrospektivu: test krvi serum, standardni antigen, agar gel. Šema za postavljanje: agar obloge se pripremaju na predmetnom predmetu, pripremaju se jažice, dodaju se reakcione komponente u jažice prema određenoj shemi, staklo sa reakcijom se stavlja u termostat na 37-38 C. Reakcija se snima nakon 48 sati. Pozitivna reakcija je stvaranje bijele precipitacijske trake.

55. RGad, RTGAd. RGAd: esencija: u adsorpciji crvenih krvnih zrnaca na površini ćelija inficiranih virusom. Ciljevi: indikacija virusa. Komponente:ćelijska kultura inficirana materijalom koji sadrži virus; suspenzija crvenih krvnih zrnaca . Šema za postavljanje: jednoslojna ćelijska kultura je prethodno inficirana ispitnim materijalom. Kulture se dreniraju u potporni medij. Operite Hanks rastvorom. Dodaje se suspenzija crvenih krvnih zrnaca. Kontaktirajte 5-15 minuta na sobnoj temp. računovodstvo: sprovedeno pod svetlosnim mikroskopom. Pozitivno – crvena krvna zrnca se adsorbiraju na ćelije; negativan – crvena krvna zrnca slobodno plutaju. RTGAd: suština: u vezivanju specifičnih antitijela za površinu ćelija inficiranih virusom, što dovodi do inhibicije adsorpcije na stanicama eritrocita. Ciljevi: identifikacija izolovanog virusa. Komponente: kontaminirana ćelijska kultura; specifični serum; suspenzija crvenih krvnih zrnaca. Šema za postavljanje: jednoslojna ćelijska kultura je prethodno inficirana jednoslojnim početnim materijalom koji sadrži virus. Sipati u podlogu za hranjenje i dodati 0,8 ml specifičnog seruma. Kontaktirajte 20-30 minuta. Dodaje se suspenzija crvenih krvnih zrnaca. Kontakt 5 – 15 minuta. računovodstvo: Za kontrolu, moraju instalirati RGA. Obračun u eksperimentalnim epruvetama: pozitivno - crvena krvna zrnca slobodno plutaju, negativna - crvena krvna zrnca također slobodno plutaju. Obračun u kontrolnim epruvetama sa pozitivnim – adsorpcijskim, negativnim – slobodnim plutanjem.

6. Virusne nukleinske kiseline.+ RNA je virusna nukleinska kiselina koja ima i funkciju informativne RNK. Informacije o sistemu za sintezu proteina u RNK+ se odmah prenose u genomsku RNK bez transkripcije. -Virusi koji sadrže RNK su virusi sa jednolančanom RNK koja nema funkciju glasničke RNK u takvim virusima, sinteza glasničke RNK (transkripcija) se dešava na šablonu minus lancima genomske RNK pomoću enzima specifičnog za virus koji je blisko povezan; sa RNA gnoma, RNK-ovisna RNA polimiraza. Postoje virusi koji sadrže i plus i minus RNA lance, to uključuje adenoviruse i paramiksoviruse. Genomska informacija u dvolančanoj DNK je kodirana na oba lanca. Nukleinske kiseline su predstavljene polinukleotidima koji se sastoje od pojedinačnih nukleotida. Njihova količina u nukleinskoj kiselini varira. Svaki nukleotid se sastoji od 3 podjedinice: ostatka fosforne kiseline, ugljikohidrata i azotne baze.

9. Struktura virusa. Osnovni oblici. Vrste simetrije. Struktura: DNK: obično dvolančana, informacija o genu je kodirana na oba lanca. Virusna DNK može biti raspoređena na linearni, kružni način. Može biti jednolančana. Virusne RNK: često jednolančane, rjeđe dvolančane. Poređeno linearno, kružno, fragmentirano. U pravilu se sastoje od 11-12 fragmenata. Jednolančana vir RNA može biti dva tipa: plus lanci i minus lančane RNK (negativni genom). Spiralna Ovo je tip sim u kojem su kapsomeri smješteni oko nukleinske kiseline na spiralni način. Veliki virusi i neki virusi srednje veličine imaju ovu vrstu sim-a. Oblik: štapićasti, višestruki, sferni, ovalni. Kod virusa u obliku štapa, kapsomeri su raspoređeni oko nukleinske kiseline u spiralnim zavojima istog promjera, usko jedan uz drugog. Kod sferičnih virusa, kapsomeri su raspoređeni u spiralu, ali različitog promjera. Kubični tip: Većina malih virusa i značajan dio virusa srednje veličine ga imaju. Oblik takvih virusa je sferičan. Kapsomeri kapside nalaze se oko kiselih jezgara kao oko pravilnog izometrijskog tijela. Proteinska ljuska takvih virusa približava se obliku ikosaide, pravilnog lica sa 20 strana. Kombinovano tip simetrije: sastoji se od spiralne i kubne. Imaju ga svi fagi i neki kompleksni virusi iz porodice coxviridae. Imaju kubičnu vanjsku ljusku i spiralnu kapsidnu školjku. Fagi imaju ikoseindričnu glavu i spiralni proces.

18. Glavne faze prve faze virusne reprodukcije. Ovo je faza infekcije ćelije, tokom ove faze virion mora da kontaktira sa ćelijom, prodre u ćeliju i skine se. Prvo faza adsorpcije viriona na površini ćelije može se pojaviti na dva načina: fizičko-hemijski (nespecifičan); receptor (specifičan). Fizičko-hemijski put je određen interakcijom površinskih elektrostatičkih sila koje nastaju između pozitivno nabijenih grupa virusnih proteina i negativno nabijenih karboksina, sulfata i fosfatnih grupa ćelijskog zida. Receptor zasnovan na specifičnoj interakciji receptora virusnog proteina sa komplementarnim receptorima na površini ćelijskog zida. Receptori virusa i receptori ćelija osjetljivih na dati virus imaju komplementarnu konfiguraciju (poput ključa od brave). Ako stanica nije osjetljiva, onda se reapsorpcija nikada neće dogoditi. Sekunda penetracija – javlja se na različite načine za različite viruse: uz pomoć viropeksija; spajanjem školjki. Viropexis- Ovaj put je sličan pinocitozi. Prvo, na mjestu adsorpcije na površini stanice dolazi do invaginacije ćelijskog zida membrane, zatim se rubovi membrane zatvaraju s unutrašnjošću stanice, virion sa svim svojim membranama pojavljuje se u ćelijskoj vakuoli. By fuzija- u ovom slučaju se pod djelovanjem enzima specifičnih za virus rastapaju područja virusne ovojnice i stanične membrane koja se međusobno primaju i u ćeliji se pojavljuje samo virusna nukleinska kiselina, dok se ostaci virusa ugrađuju u omotač ćelije. Treće pozornici– deprotenacija – oslobađanje iz membrane – zavisi od puteva ulaska virusa u ćeliju. Ako se deprotonizacija ne izoluje kao zasebna faza fuzijom membrana, dešava se istovremeno sa prodorom virusa. Ako je penetracija kroz viropeksiju, tada oslobađanje virusne nukleinske kiseline iz ovojnica počinje nakon uništenja proteina, lipida i masti koji čine virusne ovojnice. Sve faze zavise od temperature.

20. Transkripcija. Ovo je prepisivanje genetskih informacija sa virusne nukleinske kiseline na virusnu informacijsku RNK, novosintetiziranu u skladu sa zakonima genetskog koda. (virus mora predstaviti protein ćeliji koja se sintetiše i pretvoriti u RNK). Krajnji proizvod transkripcije je virusna glasnička RNK. Jednolančane + RNA nemaju transkripte, ali njihova genomska virusna RNK ima informaciju vir RNA. U jednolančanoj -RNA, genom ne može obavljati funkciju glasničke RNK i njena RNK se transfleksira pomoću enzima specifičnog za virus, RNA zavisne RNA polimiraze. CRTEŽ!

21. Emitovanje. Ovo je proces prevođenja genetske informacije sadržane u virusnim glasnicima RNK u specifičnu sekvencu aminokiselina. Translacija se događa kada se četiri baze ugrađene u virusnu glasničku RNK pretvore u kod od 20 aminokiselina. Konačni proizvod translacije su virusni proteini. Sinteza proteina se odvija na ribosomima ćelije. Sastoji se od 3 faze: početak prevođenja i početak prevođenja; nastavak; prekid – kraj emitovanja. Inicijacija se zasniva na formiranju kompleksa komponenti neophodnih za početak translacije, odnosno inicijacioni kompleks se takođe zasniva na prepoznavanju ribozoma od strane virusne glasničke RNK i njegovom vezivanju za određena područja koja se nazivaju kapa. Ovo je metilirani gvanin. Nakon što prepozna kapu, ribosom klizi niz molekulu RNK glasnika dok ne stigne do mjesta gdje počinje dekodiranje informacija.

5. Hemijski sastav virusa. Virusi se sastoje od nukleinske kiseline (DNK,RNA). Nukleinske kiseline su predstavljene polinukleotidima koji se sastoje od pojedinačnih nenukleotida. Svaki nukleotid se sastoji od 3 podjedinice: ostatka fosforne kiseline, ugljikohidrata i dušične baze. Virusni proteini : Sastoji se od aminokiselina. Sastav virusnog proteina zavisi od redosleda smenjivanja aminokiselina, ovaj red je određen genetskim informacijama sadržanim u virusnom genomu. Virusni proteini se dijele na strukturne i nestrukturne. Strukturni proteini su dio zrelih viriona. Nestrukturni b nisu uključeni u zrele virione, ali su obavezni u određenim fazama reprodukcije. Strukturno Ovisno o njihovoj lokaciji u virionu, virusni proteini se dijele u sljedeću grupu: kapsidni proteini - u kapsidu; superkapsid b – u superkapsidu (uglavnom proteina, ima i masti i ugljenih hidrata); matriksni proteini – proteini membranskog sloja; proteini virusnog jezgra predstavljeni su enzimima. Nestrukturni– ovisno o funkcijama koje obavljaju dijele se na: regulator ekspresije virusnog genoma; inhibitori stanične biosinteze; induktori destrukcije ćelija; virusni protein prekursori strukturni vir proteini; neki virusni enzimi nisu dio zrelih viriona. lipidi: uglavnom su uključeni u dio surerkapsidne ljuske viriona u složenim virusima. Svi oni nisu kodirani genomom vir i su ćelijskog porijekla. Predstavljaju ih fosfolipidi i glikolipidi. ugljikohidrati: dio su superkapsida obol, nisu kodirani virusnim genomom i staničnog su porijekla, predstavljeni glikoproteinima i glikolipidima . Virusni enzimi: Oni su proteinske prirode. Oni se mogu direktno povezati s virionom, ali nisu povezani - nisu strukturni. Enzimi rane polimiraze i rane replike učestvuju u fazi promjene informacija. Klasifikovani su kao inhibitori stanične biosinteze. Enzimi koji transhibiraju virusni genom: u DNK koji sadrže viruse - DNK zavisne RNA polimiraze su prisutne u ćeliji u nekim slučajevima je dostupna virusima, u drugima nije. Može biti ćelijskog ili virusnog porijekla. Virusi koji sadrže DNK koji se razmnožavaju u jezgru su ćelijskog porijekla. U citoplazmi - virusno porijeklo - specifično za virus.

Za RNK: DNK polimiraza zavisna od RNK - nije prisutna u ćeliji, potrebna je za "-" koja sadrži RNK i DNK, koja u vir porodici retroviridae sadrži enzim koji transducira virusni genom naziva se RNK-zavisna DNK polimiraza. Ovaj enzim ima nazive: revertaza, reverzna transkriptaza. Enzimi uključeni u stvaranje virusnih proteina: proteaze, protein kenaze.

13. Bakteriofagi. Bakterijski virus. DNK i RNK bakteriofagi su poznati. Većina DNK faga je dvolančana. RNK fagi su jednolančani. Nukleinska kiselina faga okružena je poliedarskim kapsidom (glavom), za koju je kod mnogih faga pričvršćen dodatak (rep). Prečnik glava je približno 60-95 nm, a dužina procesa je 250 nm sa debljinom od 10-25 nm. Proces služi kao vezana struktura za bakteriju. Interakcija između b i mikrobnih ćelija je složen biološki proces čiji ishod zavisi od svojstava faga i manifestuje se lizom bakterijskih ćelija. bakteriofagi se koriste za dijagnostiku (antraks); za liječenje bakterijskih infekcija; za prevenciju inf (salmoneloze). CRTEŽ!

22. Replikacija virusne DNK.

23. Replikacija virusne RNK. Jednolančana RNA sa negativnim genomom:

25. Sastavljanje viriona i njihovo oslobađanje iz ćelije.

: eksplozija, ruptura, uništenje ćelije u kojoj su nastali zreli virioni (jednostavni virusi), ćelija umire. Složene strukture izlaze pupoljkom, odnosno izlaze kroz ćelijski zid i pupolje. U tom slučaju ćelija ne umire odmah, već kada se potroše njene rezerve

19. Druga faza reprodukcije.Faza pomračenja: faza promene informacija. U ovoj fazi, funkcija staničnog genoma je potisnuta zbog činjenice da nukleinska kiselina blokira virus, a virusni enzimi blokiraju genetski aparat ćelije i sintetizirajuće sisteme ćelije. Ovo uzrokuje da ćelija prestane da reprodukuje sopstvene ćelijske komponente i pređe na reprodukciju spoljašnjih komponenti. Ovdje su uključene rane replike i rane polimiraze. transkripcija: Ovo je prepisivanje genetskih informacija sa virusne nukleinske kiseline na virusnu informacijsku RNK, novosintetiziranu u skladu sa zakonima genetskog koda. (virus mora predstaviti protein ćeliji koja se sintetiše i pretvoriti u RNK). Krajnji proizvod transkripcije je virusna glasnička RNK. Jednolančane + RNA nemaju transkripte, ali njihova genomska virusna RNK ima informaciju vir RNA. U jednolančanoj -RNA, genom ne može obavljati funkciju glasničke RNK i njena RNK se transfleksira pomoću enzima specifičnog za virus, RNA-zavisne RNA polimiraze. CRTEŽ!Emitovanje: Ovo je proces prevođenja genetske informacije sadržane u virusnim glasnicima RNK u specifičnu sekvencu aminokiselina. Translacija se događa kada su četiri baze ugrađene u virusnu glasničku RNK u kod od 20 aminokiselina. Konačni proizvod translacije su virusni proteini. Sinteza proteina se odvija na ribosomima ćelije. Sastoji se od 3 faze: početak prevođenja i početak prevođenja; nastavak; prekid – kraj emitovanja. Inicijacija se zasniva na formiranju kompleksa komponenti neophodnih za početak translacije, odnosno inicijacioni kompleks se takođe zasniva na prepoznavanju ribozoma od strane virusne glasničke RNK i njegovom vezivanju za određena područja koja se nazivaju kapa. Ovo je metilirani gvanin. Nakon što prepozna kapu, ribosom klizi niz molekulu RNK glasnika dok ne stigne do mjesta gdje počinje dekodiranje informacija. Replikacija virusne DNK: Dvolančana replikacija DNK: Dvolančana DNK molekula se prvo razdvaja u 2 odvojena lanca pomoću enzima stanične nukleaze, a zatim se formira DNK virusne informacije na jednom od lanaca virusne DNK čiji je matriks. To se događa uz pomoć virusa specifičnog ili ćelijskog enzima DNK-ovisna RNA polimiraza. Zatim se virusna infor RNA seli u ćelijski ribosom gdje se događa translacija uz stvaranje virusnih proteina i enzima, uključujući enzim DNK polimirazu. Koristeći DNK polimirazu, drugi komplementarni lanac DNK se gradi od ćelijskih nukleotida. Na taj način se sintetiziraju nove dvolančane DNK molekule. Replikacija jednolančane DNK: Pojedinačni lanci DNK imaju pozitivan polaritet. Uz pomoć virusa specifičnog enzima DNK-ovisna DNK polimiraza, komplementarni minus lanac DNK se formira na virusnoj jednolančanoj DNK matrici. Sintetizira se struktura dvostruke spirale, koja se naziva replikativni oblik. Zatim, na šablonu, minus lanci replikativnog oblika formiraju plus lanci jednolančane DNK istiskivanjem plus lanaca DNK iz replikativnog oblika. Replikacija virusne RNK: Jednolančana RNK sa negativnim genomom: Odmah nakon prodiranja u ćeliju, dolazi do transkripcije sa formiranjem virusne inf RNA plus. U to je uključen enzim specifičan za virus RNA-ovisna RNA polimiraza. Vir inf RNA se zatim prevodi u proteine ​​i enzim RNA polimirazu. Nakon toga, uz pomoć RNA polimiraze, na matriksu plus lanci informacijske RNK formiraju se kćerki jednolančani minus RNA lanci. Jednolančana RNK sa pozitivnim genomom: Nakon prodiranja u ćeliju, plus RNA se odmah vezuje za ribozome gdje se prevodi u proteine ​​i enzime, uključujući enzim RNA replikazu. Zatim, pod dejstvom RNA replikaze, nastaje replikativni oblik. Na šablonu, minus RNA replikativnog oblika stvara sliku plus RNA lanaca tako što ih istiskuje iz replikativnog oblika. Replikacija dvolančane virusne RNK: sinteza glasničkih virusnih RNK ​​odvija se na dvolančanoj RNA šabloni koristeći enzim RNK-zavisnu RNA polimirazu. Transkripcija na šablonu RNA lanca, svaki fragment se transkribuje zasebno. Zatim se prevode u proteine ​​i enzim RNA polimirazu uz pomoć ovog enzima na plus lancima glasničke RNK da bi se formirale komplementarne minus lance RNK, odnosno dvolančana RNK. Sastavljanje viriona i njihovo oslobađanje iz ćelije: 2 strategije za sklapanje, sazrevanje i izlazak iz inficirane ćelije: sprovođenje sklapanja i sazrevanja unutar ćelija; kombinacija poslednje faze sklapanja viriona sa izlaskom iz inficirane ćelije.

Sastavljanje se vrši jednostavnom agregacijom, odnosno kombinacija vir proteina sa nukleinskom kiselinom nastaje pod uticajem fizičko-hemijskih faktora, odnosno dolazi do samosastavljanja. Zasniva se na ujedinjenju i specifičnom prepoznavanju neproteinskih i proteinsko-nukleinskih kiselina. Formira se nukleokapsid. Za jednostavne viruse, ovo je mjesto gdje se proces samosastavljanja završava. Kod složenih virusa proces samosastavljanja se odvija drugačije. Dio proteina ide na stvaranje nukleokapsida, koji se formira kao kod jednostavnih virusa, a dio proteina prelazi na staničnu membranu. Formirani nukleokapsid se potom kreće tamo. A do formiranja superkapsidnog omotača dolazi kada virion napusti ćeliju, tj. nukleokapsid je odozgo prekriven proteinima koji su se preselili na ćelijsku membranu i po izlasku masti i ugljikohidrata iz stanice se ugrađuju u ovu vanjsku ljusku . Postoje dva načina za izlazak: eksplozija, ruptura, uništenje ćelije u kojoj su nastali zreli virioni (jednostavni virusi), ćelija umire. Složene strukture izlaze pupoljkom, odnosno izlaze kroz ćelijski zid i pupolje. U tom slučaju ćelija ne umire odmah, već kada se potroše njene rezerve.

62-63. Ovčije i kozje boginje(rod Caprippoxvirus). Zarazni ektimi ovaca i koza(rod Parapoxvirus). Porodica: poxviridae. DNK koja sadrži. Karakteristike reprodukcije: genom virusa je vrlo velik, čak iu zaraženim stanicama, replikacija se završava nakon 6 sati. Penetracija se događa spajanjem virusne i stanične membrane. Nakon penetracije, dvolančana DNK se dijeli i replikacija počinje na oba lanca DNK odjednom. Štaviše, sinteza virusnih komponenti odvija se u citoplazmi ćelija. Sklop viriona u citoplazmi. Izlaz pupljenjem.

2. Uloga virusa u infektivnoj patologiji životinja. Trenutno su virusne bolesti od velikog značaja u zaraznoj patologiji životinja, ljudi i biljaka. Njihova uloga se povećava smanjenjem i eliminacijom bakterijskih, mikotičnih i protozoalnih bolesti. Virusne bolesti čine oko 80 posto u medicini i 50 posto u veterini. Postoji preko 500 poznatih bolesti uzrokovanih virusima. Virusno porijeklo je utvrđeno kod posebno opasnih bolesti poput slinavke i šapa, goveđe kuge, svinjske kuge itd. Virologija se može podijeliti na opću i specifičnu. Općenito proučava prirodu i porijeklo virusa, njihovu klasifikaciju, strukturu i hemijski sastav, genetiku i selekciju, metode dijagnoze i prevencije, osnove antivirusnog imuniteta. Privatni vir proučava nazive i sistematski položaj specifičnih patogena, strukturu, veličinu i stabilnost viriona, terapiju, dijagnostičke metode i prevenciju.

1. Istorija razvoja. Prvi period počinje od antičkih vremena do 1892. U tom periodu virologija kao samostalna nauka nije postojala. Bakteriolozi su proučavali bolesti nepoznate etiologije. Drugi period - formiranje virologije kao same nauke - obuhvata 1892-1950. ovaj period je započeo otkrićem ruskog botaničara D.I. Ivanovsky (1898) o filiabilnosti uzročnika bolesti mozaika duhana. Ivanovski je, proučavajući etiologiju bolesti duvana, ustanovio da ovu bolest uzrokuje poseban sićušni mikroorganizam koji prolazi kroz bakterijske filtere. Nevidljiv je pod svetlosnim mikroskopom. Ne raste na umjetnim podlogama za rast. Kasnije su slični MO izolovani iz drugih biljaka, kao i od životinja i ljudi. Oni su ujedinjeni u nezavisnu grupu - ultraviruse. 1930-ih, pileći embriji počeli su se koristiti u virološkoj praksi. Godine 1956. Stanley je uspio podijeliti virus na njegove glavne komponente - proteine ​​i nukleinske kiseline. Krajem 40-ih godina 20. vijeka došlo je do stvaranja elektronskih mikroza Rudenberg. A lagani je kreirao Leeuwenhoek. Sovjetski naučnici koji su dali doprinos virologiji: Ždanov, Lihačov, Sjurin.

48. Metoda za dobijanje jednoslojnih primarnih tripsinizovanih ćelijskih kultura. Jednoslojne ćelije su potrebne za indikaciju virusa. Dobija se iz tkiva ili organa tretiranjem tripsinom. Jednoslojne dijele se u 4 grupe: primarne tripsinizirane; Tkivo se drobi i raspršuje sa enzimom tripsinom. Zatim se tripsin odstranjuje centrifugiranjem i u nastali sediment se dodaje određena zapremina tekućeg hranjivog medija. Ćelije se uzgajaju u jednom sloju - jednosloju - na unutrašnjoj površini stakla. Postoji stalna potreba za organima zdravih životinja. I koriste se embrioni stari 9-112 dana. Ovoskopija. Shell obrada. Koristeći makaze, odrežite školjku iznad ivice puge. Embrion se sterilno uklanja. Operite Hankovim rastvorom. Priprema se kožno-mišićna vreća. Operite Hankovim rastvorom. Tkanina je usitnjena makazama. Prebacite u bocu za tripsinizaciju. Tikvica se stavi na magnetnu mješalicu na 15 minuta. Suspenzija se hladi u posudi sa ledom. Filtrirajte u prijemnik za tikvicu. Suspenzija ćelija se centrifugira 10-15 minuta. Tripsin se uklanja. Kombinovana masa se priprema iz ćelijskog sedimenta, sipa u epruvete od 1 ml i ćelije se uzgajaju.

47. Osnovni rastvori i hranljivi mediji.Po poreklu Postoje prirodna i umjetna podloga za hranjenje. Prirodni - od biološki aktivnih: embrionalna, alantoična vitalnost plus dodatak izbalansiranih rastvora soli. Umjetno - pripremljeno od pojedinačnih komponenti. Najčešće se koriste univerzalni mediji za hranjenje, ili mogu postojati posebni. Univerzalna je srednja 199 i Igla srednja. Sastav umetničkih medija treba da sadrži aminokiseline, vitamine, enzime i uravnotežene rastvore soli, ponekad indikator (fenol crveno). Suština indikatora je otkrivanje virusa promjenom boje. Tokom života ćelije, pH se menja na kiselu stranu. U kiseloj sredini, boja indikatora se mijenja od grimizno crvene do žute. Normalni krvni serum se ponekad dodaje u hranljivu podlogu u količini od 100 posto zapremine hranljive podloge. Krvni serum se naziva faktor rasta. Dodaje se za proliferaciju ćelija, samo u medijumu za rast . Po namjeni upotrebe: medij za rast - uključen serum; podrška – bez seruma. Izbalansirani rastvori soli: svi su derivati ​​fiziološkog rastvora. Koristi se kao osnova za pripremu pit medija i za sve manipulacije sa ćelijskim kulturama (da se nešto opere). Ovo su rješenja Hanksa i Earlea. Rastvori za disperziju: za odvajanje ćelija od drugih i ćelija od stakla. Otopine pepsina, tripsina. Od stakla - versine rješenja. Rastvor versina vezuje katione kalcijuma.

50. Titar virusa. Titar virusa je količina virusa, odnosno doza po jedinici zapremine materijala koji sadrži virus. 3 metode titracije: 1 metoda: titracija virusa prema infektivnom učinku virusa sa statistički procijenjenim učinkom. Prema metodi čitanja i menchu ​​ili Kerber. Titar se izražava u 50% doza. Ovo je ED50. Za ovu metodu titracije može se koristiti bilo koji biološki model, ali ovaj model mora biti osjetljiv na virus koji se titrira (ćelijske kulture, embriji, laboratorijske životinje). Prema infektivnom učinku inficiranih bioloških modela dijele se na sljedeće: klinički prepoznate; prema patomorfološkim promjenama; nakon smrti modela; akumulacijom hemaglutinina. Rezultati rada zavise od doze virusa. Utvrđeno je da je doza virusa koja uzrokuje 50 posto infektivnog efekta najmanje osjetljiva na fluktuacije i da je najodrediva od svih mogućih doza. Titar se izražava u efektivnim dozama od 50 posto. Ovo je ED od 50. Ovisno o korištenom biološkom modelu i postignutom efektu, doza od 50 posto može se izraziti u sljedećim jedinicama: LD 50 – Ovo je 50 posto smrtonosne doze primljene za laboratoriju, koja je živa u smislu smrtonosnog efekta. ID 50– ovo je 50-postotna infektivna doza koja je određena da bi laboratorija bila živa na osnovu kliničkih znakova ili patomorfoloških promjena. ELD 50– ovo je 50 posto embrionalne smrtonosne doze određene na pilećim embrionima prema godini ishoda. EID 50– ovo je 50-postotna embrionalna infektivna doza određena u pilećim embrionima patomorfološkim promjenama i akumulacijom hemaglutinina. TsPD 50– ovo je 50 postotna citopatogena doza određena u ćelijskim kulturama pomoću CPD-a. Ako u zaraženim sistemima ne uočimo 50 posto efekta koji je ID 50, tada se titar izračunava čitanjem i izbornikom: lg LD 50 = lg ECD - (% godina ECD - 50%) / (% godina ECD - % godina ECD) SVE OVO POMNOŽENO SA lg faktorom razrjeđenja. Metoda 2 : na infektivno djelovanje virusa uz procjenu pojedinačnog efekta. Kod metode formiranja plaka u ćelijskoj kulturi postoji jedan efekat. Izraženo u jedinicama koje stvaraju velike boginje ili jedinicama koje formiraju plak PFU. Pripremite 10-struko razrjeđenje virusa; odabrati osjetljiv biološki model; U svakom razrjeđivanju virusa, najmanje 4 embriona su inficirana. Titar se izračunava pomoću formule T=a podijeljeno sa V*n. a - prosječan broj mrlja ili plakova. V je zapremina sadržaja materijala = 0,2. n je stepen razblaženja virusa. Metoda 3: hemaglutinirajućim učinkom virusa u GAEN-u. Stavili su RGA.

38.Principi laboratorijske dijagnostike virusnih infekcija.

Laboratorijske istraživačke predstave važnu ulogu u postavljanju dijagnoze zaraznih bolesti, propisivanju etiotropne terapije i praćenju efikasnosti lečenja. Proces specifične laboratorijske dijagnostike zasniva se na identifikaciji patogena i odgovoru ljudskog organizma tokom infektivnog procesa. Sastoji se od tri faze: prikupljanja materijala, transporta (master br. 39) i proučavanja u laboratoriji: 1) Virološka metoda uključuje dvije glavne faze: izolaciju virusa i njihovu identifikaciju. Za izolaciju virusa koriste se stanične kulture, pileći embriji, a ponekad i laboratorijske životinje. Prisustvo virusa u inficiranim kulturama određeno je razvojem specifične degeneracije ćelija, tj. citopatogeno dejstvo, otkrivanje intracelularnih inkluzija, kao i na osnovu detekcije specifičnog antigena imunofluorescencijom, pozitivnim reakcijama hemadsorpcije i hemaglutinacije. Virusi se identificiraju imunološkim metodama: reakcija inhibicije hemaglutinacije, fiksacija komplementa, neutralizacija, precipitacija gela, imunofluorescencija. 2) serološke reakcije; 3) imunološka metoda (biotestovi); 4) ELISA i PCR. Nakon prijema rezultata pregleda i uzimajući u obzir epidemiološke i kliničke podatke, postavlja se konačna dijagnoza.

39. Preuzimanje, priprema i prosljeđivanje patenta. Materijal za virusologa. Istraživanja.

Sakupljanje, transport i ispitivanje Pat. materijal je regulisan veterinarskim zakonodavstvom. Prilikom uzimanja uzima se u obzir tropizam virusa - preferirana lokalizacija virusa u datoj bolesti i patogeneza. Vrijeme od zastoja. materijala do kraja njegovog istraživanja - 2-4 sata. Ako vam treba više vremena, sačuvajte (hemijske metode - 50% rastvor glicerola, fizičke - zamrzavanje), ali ne za luministe. mikroskopija. Prevoz do specijal kontejneri sa pratećim dokument i kurir. Priprema uključuje ekstrakciju virusa iz ćelija. Tečnost materijal – filtracija i centrifugiranje. Za čišćenje bakterija - bakterijskih. filteri i antibiotici (500-2000 jedinica po 1 ml), za gljivice - fungicidi (25 jedinica po 1 ml), držati 30-40 minuta, inokulirati pitatom. okruženje (aerobi – MPA, MPB, MPZh, anaerobi – Kitta-Tarozzi, gljive – Chapek, Saburo). Gusti patentni materijal: 1) uzeti patentni materijal 1-1,5 g; 2) seckati makazama; 3) oprati sterilnom. staklo ili pijesak u malteru; 4) 10% suspenzija sa Hanks rastvorom; 5) zamrznuti i odmrznuti 2 puta; 6) filtriranje kroz filter od gaze; 7) centrifugiranje (3000 o/min, 15 min); 8) supernatantna tečnost - materijal koji sadrži viruse, testira se na bakterije (hranjive podloge), dodaju se antibiotici i fungicidi.

40. Mikroskopska metoda istraživanja u virologiji.

1. Svetlosna mikroskopija: 1) za otkrivanje virusa malih boginja (Morozovljeva metoda srebrenja); 2) za otkrivanje inkluzijskih tijela (ovo je akumulacija viriona ili iz dijelova ili proizvoda reakcije ćelije na virus; mogu biti intranuklearna i citoplazmatska); 3) otkrivanje virusa CPD (zaokruživanje, fragmentacija, smrt); 4) otkrivanje simplasta; 5) rad sa C/C; 6) procena serologa. reakcije (ELISA, RGad, RTGAd). 2. Luminiscenciona mikroskopija: suština je da se pri zračenju UV zracima atomi pobuđuju, zatim prelaze u početno stanje sa oslobađanjem energije u vidu svetlosnog zračenja, njen intenzitet se ocenjuje u krstovima (smaragdno-zeleno = ++ ++ zeleno-žuto = + bez sjaja, preparat je obojen fluorohromima; Kompleks - MVP Suština MVP-a je specifična. interakcija antitijela sa serumom (konjugatom) označenim fluorohromom. 3.Elektronska mikroskopija: 1) detekcija bilo kog virusa; 2) proučavanje njegove veličine, oblika, strukture, vrste simetrije, reprodukcije; 3) proučavanje interakcije virusa sa ćelijom.

Grupa kanadskih naučnika sa Univerziteta Alberta u Kanadi izvela je prilično rizičan eksperiment, usljed kojeg su uspjeli oživjeti izumrlu vrstu konjskih boginja koja nije opasna za ljude. Pokazalo se da je to relativno jednostavno i jeftino i izazvalo je predvidljiv napad panike među običnim ljudima.

Virusi konjskih boginja su srodnici velikih boginja, koje su u prošlom veku odnele oko pola miliona života, iako su poznate čovečanstvu hiljadama godina. Naučnicima su bili potrebni vekovi i mnogo novca i truda da pobede virus malih boginja. Kanadski naučnici predvođeni virologom Davidom Evansom uspjeli su obnoviti virus koristeći metode genetskog inženjeringa za samo 100.000 dolara. Da bi rekreirali virus, naučnici su koristili izvorni kod koji je dostavljen običnom poštom. Tim je kupio preklapajuće fragmente DNK, svaki dug oko 30.000 parova baza, od Genearta (Regensburg, Njemačka), koji komercijalno sintetiše DNK. To im je omogućilo da spoje genom virusa od 212.000 baznih parova. Virus je uveden u ćelije koje su već bile zaražene drugim virusom boginja i one su počele proizvoditi komadiće virusa konjskih boginja. Virus je potom uzgajan, sekvencioniran i karakteriziran, te je imao predviđenu sekvencu genoma. Ova tehnologija je opisana još 2002. godine u članku u Proceedings of the National Academy of Sciences, ali je prvi put korištena.

Duh iz boce

Konjske boginje su bezbedne za ljude i ne predstavljaju ozbiljnu pretnju Poljoprivreda i takođe se smatra izumrlim. Međutim, uspjeh Evansa i njegove grupe uzbudio je njegove kolege. "Ako se ovo može učiniti s kozjim boginjama, onda nema sumnje da se može učiniti i sa ljudskim boginjama", rekao je virolog Gerd Sutter sa Ludwig-Maximilians-Universität München (LMU) u Njemačkoj. SZO je već nazvala eksperiment kanadskih naučnika "Džinom iz boce". Prema mišljenju stručnjaka, teroristi ili odmetničke države mogu iskoristiti potencijal biotehnologije. Rad je izazvao obnovljenu debatu o tome da li posljednja dva poznata živa primjerka Variola vera, ili velikih boginja, treba uništiti. Svjetska zdravstvena organizacija je 1979. godine službeno proglasila pobjedu nad ovom strašnom bolešću globalnom vakcinacijom. Istovremeno je postignut dogovor da se unište svi preostali uzorci virusa, izuzev dva, koji su prebačeni u tajne i visoko čuvane laboratorije u Sjedinjenim Državama i Rusiji (Centrima za kontrolu i prevenciju bolesti (CDC). ) u Atlanti i Ruskom istraživačkom institutu za virusne lijekove u Moskvi). Ruski uzorci su kasnije prebačeni u Državni naučni centar za virusologiju i biotehnologiju u Novosibirsku (u selu Koltsovo). Neki naučnici vjeruju da će proučavanje virusa pomoći svijetu da se pripremi za buduće epidemije.

Duh ili dobra vila?

Međutim, Evansovo istraživanje nije samo duh iz boce: kako sam naučnik vjeruje, njegov eksperiment ima i naučnu vrijednost. Razvijajući tehnologije za stvaranje virusa, naučnici očekuju da stvore efikasne vakcine protiv raznih bolesti, da nauče kako da kontrolišu viruse i, eventualno, da razviju efikasan lek protiv raka. Tonix, farmaceutska kompanija sa sjedištem u New Yorku s kojom je Evans sarađivao, nada se da će koristiti virus konja za poboljšanje vakcine protiv velikih boginja kod ljudi. Trenutna vakcina izaziva ozbiljne nuspojave kod nekih ljudi. Sintetiziranje poxvirusa, na primjer, može pomoći u razvoju virusa koji mogu ubiti tumore, rekao je Evans. Naučnik smatra da je, naravno, uvijek potrebno zapamtiti “dvostruku svrhu” takvih istraživanja, ali je istovremeno potrebno “iskoristiti nevjerovatnu moć ovog pristupa” u borbi protiv opasnih bolesti.

Laboratorijske kontaminacije: priče o džinovima puštenim iz boca

Istraživanja zaraznih bolesti oduvijek su bila opasna i ponekad završavaju tragično

• Prvi slučajevi i intralaboratorijske infekcije tifusnom groznicom zabilježene su 1885. godine, o čemu je izvještaj objavio K. Kisskalt (1915). U narednim godinama, broj prijavljenih slučajeva infekcije u laboratorijama se povećavao, što se objašnjava ekspanzijom istraživanja patogenih mikroorganizama u mnogim zemljama svijeta. Do 1950. godine broj dokumentovanih laboratorijskih infekcija dostigao je 6.000.
• Utvrda kuge "Car Aleksandar"ja". Nadaleko su poznata dva izbijanja kuge u tvrđavi Cara Aleksandra I u Kronštatu, koja je korištena kao laboratorija za bolest. Uprkos strogoj kontroli i svim preduzetim merama bezbednosti, u „tvrđavi od kuge“ 1904. godine umire i razbole se dr V.I. bolestan, ali je dr. L.V. Padlevsky izliječen
• Prva katastrofa u Marburgu. Službeno registrovano izbijanje bolesti uzrokovane ovim virusom dogodilo se 1967. godine u gradu Marburgu u Njemačkoj u jednoj od farmaceutskih fabrika. Čuvar koji se brinuo o životinjama umro je dvije sedmice nakon što je primijetio simptome misteriozne bolesti kod zelenih majmuna dovedenih u Behringovu laboratoriju iz centralne Afrike. Vakcina je uzgajana u laboratoriji koristeći ćelije bubrega ovih majmuna. Vrlo brzo su se razboljeli i ostali laboratorijski radnici. Slični slučajevi zabeleženi su u Behringovim laboratorijama u Frankfurtu i Beogradu, u koje su uvezeni zeleni majmuni iz iste serije. Dvadeset četiri osobe koje su radile u laboratoriji postale su žrtve neke nepoznate bolesti, a kasnije se razboljelo šest medicinskih sestara koje su se brinule o njima. Od svih zaraženih sedam osoba je umrlo.
• Godine 1976. došlo je do intralaboratorijske kontaminacije. Virus ebole u Velikoj Britaniji, kao rezultat injekcije kontaminiranom iglom.
• Laboratorija "Vektor". Godine 1988., u Državnom istraživačkom centru za virusologiju i biotehnologiju („Vektor“), Koltsovo, jedan zaposlenik je zaražen Marburg groznicom kada je uboden iglom. Bolesni radnik Nikolaj Ustinov je preminuo.
• Drugi slučaj intralaboratorijske infekcije u Vektoru. Godine 1990., zaposlenik u laboratoriji Sergej Vjazunov zarazio se virusom Marburg. Pretpostavlja se da je do infekcije došlo preko očiju. Vyazunov
• Laboratorijska kontaminacija virusom ebole u Obali Slonovače. Naučnik se razbolio nakon što je izvršio obdukciju divlje šimpanze. Pacijent se liječio u Švicarskoj i oporavio se.
• 48 Centralni istraživački institut Ministarstva odbrane Ruske Federacije: Godine 1996. umrla je laboratorijska asistentica u Virološkom centru Istraživačkog instituta za mikrobiologiju Ministarstva obrane Ruske Federacije u Sergijevom Posadu, koja se zarazila virusom ebole nepažnjom tako što je ubola prst dok je davala injekcije eksperimentalnim zamorcima. .
• Fort Detrick, Merilend (SAD): 2004. godine jedan laboratorijski radnik se zarazio virusom Marburg, također zbog uboda igle. U ovom slučaju, oboljela osoba je ozdravila
• Opet "Vektor". Dana 19. maja 2004. od ebole je umrla Antonina Presnjakova, 46-godišnja viša laboratorijska asistentica na Odsjeku za posebno opasne virusne infekcije Istraživačkog instituta za molekularnu biologiju Državnog naučnog centra za virusologiju i biotehnologiju.

VIROLOŠKI LABORATORIJ- ustanova koja se bavi proučavanjem virusa i virusnih bolesti ili proizvodnjom virusnih preparata (vakcine, dijagnostika, antivirusni imunološki serumi i dr.).

V. l. odvojila se od bakterioloških i počela postojati kao samostalne jedinice u 20. vijeku. U SSSR-u je prvi V. l. nastali su 30-ih godina. Sada u zemlji postoji nekoliko medicinskih instituta. virologije, kombinirajući V. l. različiti profili na kojima se proučavaju virusne bolesti, istražuje priroda virusa, razvijaju se i proizvode virusni lijekovi (Institut za virusologiju imena D.I. Ivanovskog, Institut za poliomijelitis i virusni encefalitis, Svesavezni istraživački institut za gripu, Moskovski istraživački institut za viruse Pripreme itd.). V. l. Postoje i u većini saveznih i republičkih instituta za mikrobiologiju i epidemiologiju, obično profilisanih u odnosu na proučavanje jedne ili više bolesti. Osim toga ima cca. 150 V. l. u republičkim, regionalnim i gradskim sanitarno-epidemiološkim stanicama, kao i laboratorijama u celini za polaganje. institucije; Uglavnom se bave dijagnostičkim poslovima. Pored meda V. l., postoje laboratorije za proučavanje virusnih infekcija životinja i biljaka.

Veličine i stanja V. l. zavisi od namene i obima posla. U svim slučajevima imperativ je osigurati sigurnost osoblja i mogućnost rada u sterilnim uslovima.

V. l. sastoji se od samog laboratorija i pomoćnih prostorija - za obradu i sterilizaciju posuđa, pripremu hranljivih podloga (za uzgoj ćelijskih kultura, identifikaciju bakterija i mikoplazmi), liofilizirajućih virusa, inkubatora, vivarijuma itd. Ako je V. l. je dio veće ustanove (zavod, sanitarno-epidemiološki centar, stanica i sl.), pomoćne prostorije mogu biti zajedničke većem broju laboratorija ili cijeloj ustanovi.

Zapravo V. l. izgrađena je kao bakteriološka laboratorija (vidi), uzimajući u obzir specifičnosti rada - uzgoj kultura ćelija i tkiva, ultracentrifugiranje, čuvanje virusa na niskim temperaturama itd. Opremljen je za dijagnostički rad (izolacija virusa i serološke reakcije), za proučavanje svojstava virusa i njihove strukture, provođenje genetsko istraživanje i tako dalje.

Soba V. l. treba da se lako pere i tretiraju dezinfekcionim rastvorima. U tu svrhu zidovi su farbani uljane boje ili popločan, pod je obložen linoleumom ili pločicama. Prostorija je opremljena dovodnom i izduvnom ventilacijom sa približno 10-strukom razmjenom zraka; mora imati hladnu i toplu vodu, kao i plin za rasvjetu. Preporučljivo je imati centralizovani sistem komprimovanog vazduha (pritisak do 1,0-1,2 atm) i vakuuma (do 700-760 mm Hg rezidualnog pritiska). Za zaposlene se moraju obezbijediti tuš kabine. Pri radu s posebno opasnim virusima potrebno je neutralizirati (kuhanjem) otpadne vode.

U V. l. Obavezno je imati posebnu prostoriju za sterilni rad, koja se sastoji od dva odjeljka odvojena staklenom pregradom. Unutrašnji prostor - kutija - treba da bude mali (6-8 m2), sa niskim plafonom (vidi Kutije, mikrobiološke). Vrata treba da se otvaraju u predsoblje koje služi za odijevanje dodatne odjeće, odvojeno drugom pregradom od ostatka prostorije. Za sterilizaciju kutije i pre-boksa koriste se baktericidne lampe napravljene od uviol stakla sa pretežnom talasnom dužinom od 254 nm (vidi Germicidni iradijatori). U tu svrhu možete koristiti BUV lampe, koje se ugrađuju po stopi od 2-2,5 W po 1 m 3 prostorije; prosječni vijek trajanja lampe 1500 sati. U kutije je obavezno obezbediti sterilni vazduh dovodna ventilacija sa 4-5 puta zamjenom; Za sterilizaciju vazduha mogu se koristiti LAI K filteri od tkanine Petryanov - tipa FPP.

Kutija treba da sadrži samo alat i pribor neophodan za rad, sterilizator za alate, tegle sa širokim otvorom sa dezinfekcionim rastvorom i rezervoar sa poklopcem za kontaminirani materijal. Pri radu sa uzročnicima posebno opasnih infekcija (male boginje, encefalitis itd.), u kutiju se ugrađuje dodatna stolna kutija u kojoj se filtriranjem steriliziraju ulazni i izlazni zrak. Osnovna pravila za rad s posebno opasnim patogenima regulirana su posebnim uputama.

Za dezinfekciju u V. l. Najčešće se koriste lizol 1-5%, hloramin 1-5%, formaldehid 2,5-5%.

Pored uobičajenog bakteriološkog staklenog posuđa, V. l. mora imati homogenizator za mljevenje tkiva, magnetne miješalice, mikroskope (svjetlo za istraživanje u običnom i ultraljubičastom svjetlu, kao i elektronsko), centrifuge različite snage (na 3-5 hiljada o/min, a takođe i sa hlađenjem na 12-15 hiljada) i 60 hiljada o/min), koji ima set rotora. Potrebni su termostati koji istovremeno rade na različitim temperaturama (od 25 do 40°), uključujući i dovod ugljičnog dioksida, ili termostatske prostorije. V. l. opremljena hladnjacima ili hladnjacima sa t° +4°, -20° i -40°. Za čuvanje ćelijskih kultura potrebne su Dewarove tikvice sa tečnim azotom ili frižideri sa temperaturama ispod -90°.

Laboratorije koje proučavaju biohemiju virusa opremljene su poput hemijskih laboratorija. Rad sa radioaktivnim izotopima obavlja se u posebno opremljenoj prostoriji.

U odjeljenjima za pripremu medija, pored uobičajene hemikalije. posuđe, potrebno je imati instalacije za prečišćavanje vode, koja se dvostruko destiluje u staklenim aparatima ili deionizira na kolonama sa jonoizmenjivačkim smolama. Za sterilizaciju rastvora koji se ne mogu autoklavirati, koristite Seitz azbestne papirne sterilizacione ploče postavljene u filtere tipa Salnikov (F-140, FS-3, FS-7, itd.); filtracija se vrši pod pritiskom od 0,5 atm. U istu svrhu možete koristiti staklene ploče (svijeće) i Millipore filtere s veličinom pora od 0,22 do 1,2 mikrona (vidi Bakterijski filteri).

Vivarijum (vidi) mora biti odvojen od prostorija V. l. Mora imati prostorije za karantin dolaznih životinja, za njihovu infekciju i posebno za obdukciju. Rad sa malim laboratorijskim životinjama obavlja se iza zaštitnog stakla. Kaveze za životinje je bolje dezinficirati parom. Takođe je potrebno imati krematorij za spaljivanje životinjskih leševa i smeća.

Bibliografija: Kravchenko A.T. Principi organizacije i načina rada viroloških i rikecioznih laboratorija, Vodič za laboratorije, dijagnostika virusnih i rikecioznih bolesti, ur. P. F. Zdrodovsky i M. I. Sokolov, str. 219, M., 1965; Laboratorijska dijagnostika virusnih i rikecijalnih bolesti, ur. E. Lenneth i N. Schmidt, trans. sa engleskog, str. 9, 123, itd., M., 1974; Vodič za laboratorijsku dijagnozu velikih boginja za programe eradikacije velikih boginja, Ženeva, SZO, 1969; Virologische Praxis, hrsg. v. G. Starke, Jena, 1968, Bibliogr.

Izbijanje smrtonosne epidemije virusa ebole bez presedana u zapadnoj Africi, koja prijeti da se proširi na evropski kontinent. SIDA, koja uništava desetine miliona ljudi, i druge dosad nepoznate strašne bolesti ljudi, životinja i biljaka. Gdje nam padaju na glavu? Kakvu ulogu u tome imaju tajne laboratorije CIA-e i američkih vojnih odjela?

„Ne može biti! Rak nije zarazan! Sve su to izmišljotine, poput “teorija zavere” ili susreta sa Marsovcima!” Ovako su američke vlasti odgovorile na optužbe venecuelanske vlade da je veliki vođa Bolivarske revolucije Hugo Chavez uništen zarazom virusom raka.

Međutim, stručnjaci smatraju da se toliki broj latinoameričkih lidera (i ljevica!) koji su otprilike u isto vrijeme oboljeli od raka ne može objasniti prirodnim uzrocima. Među njima su, uz Chaveza, argentinski predsjednik Néstor Kirchner, koji ga je zamijenio na funkciji Cristina Kirchner, brazilski predsjednik I. Lula da Silva, koji je nakon njega došao na vlast Dilma Rousseff, paragvajski predsjednik Fernando Lugo (koji je svrgnut tokom desničarske krilni udar 2012. godine, koji je organizirala CIA i ubrzo nakon toga dijagnosticiran rak imunološkog sistema); Kubanski lider Fidel Castro jedva je preživio misteriozni rak crijeva koji ga je pogodio nakon Samita naroda 2006. u argentinskom gradu Kordobi.

Malo ljudi zna da su mnogo prije brutalnih eksperimenata u koncentracionim logorima u njemačkim logorima smrti tokom Drugog svjetskog rata, Amerikanci izvodili slične eksperimente na stanovnicima Latinske Amerike pod pokroviteljstvom Rockefeller instituta za medicinska istraživanja.

Jedan od fanatika, Cornelius Rhodes, pisao je svom prijatelju 1931. godine: „Ovde u Portoriku je sve divno, sa izuzetkom Portorikanaca. Oni su nesumnjivo najprljaviji i najlijeniji degenerici lopovske rase koja nastanjuje ovu hemisferu. Za javno zdravlje neophodna su neka sredstva da se svi unište. I učinio sam sve da ubrzam ovaj proces – ubio sam osam tokom eksperimenata, a mnoge zarazio rakom. Ovdje nema zdravstvenog osiguranja ni socijalnih beneficija – tome se dive doktori koji mogu slobodno liječiti do smrti i mučiti svoje nesretne pacijente.”

“Doktor” je intravenozno ubrizgavao biološke supstance koje izazivaju rak, a najmanje 13 pacijenata je umrlo kao rezultat ovih okrutnih eksperimenata.

U 1950-ima, Rhodes je postao direktor programa istraživanja kemijskog i biološkog oružja u vojnom centru Fort Detrick u Marylandu, poligonima u pustinji Utah i Panamskom kanalu, a zatim se pridružio američkoj energetskoj komisiji, koja je nesuđene Amerikance izložila radioaktivnom zračenju kako bi se utvrdio nivo “sigurnog zračenja” i pojava malignih tumora kao rezultat ovih eksperimenata.

Nakon Rhodesove smrti, Američko udruženje za borbu protiv raka ustanovilo je nagradu u njegovo ime. Međutim, 2004. godine, nakon skandaloznih otkrića njegovih divljačkih eksperimenata, predsjednik udruženja S. Horwitz je najavio da se najviša nagrada američkim onkolozima više neće povezivati ​​s imenom Rhodes zbog „kontroverzne prirode njegovih aktivnosti.”

Takvih nitkova iz nauke u Sjedinjenim Državama je bilo deset centa, a oni su testirali gotovo sve infekcije koje su izmislili, prvo u Latinskoj Americi (ne zaboravljajući na eksperimente na vlastitim građanima). Nakon rata, polje se suzilo zbog činjenice da su se mnogi počeli obraćati SSSR-u za medicinsku i naučnu pomoć. Ali nakon kolapsa Sovjetski savez Zaista bezgranični izgledi otvorili su se pred ovim žrvicama.

Obama je već nekoliko puta bio prisiljen da se izvini zemljama Latinske Amerike za eksperimente na ljudima 40-ih i 50-ih godina, koji su doveli do širenja sifilisa i drugih spolno prenosivih bolesti, masovne neplodnosti i raznih epidemija. Međutim, takvo izvinjenje (tek nakon objavljivanja nepobitnih dokaza!) neće oživjeti milione mrtvih i žrtava američkog bioterorizma, niti će dovesti do prestanka ovakvih „eksperimenata“ u budućnosti (po principu „ako nije uhvaćen, nije lopov”).

Od kasnih 60-ih godina počinje ubrzani razvoj i stvaranje raznih modifikacija virusa raka. Rad je koordiniran sa Nacionalnim institutom za rak, koji je službeno razvio tretmane za "bolest stoljeća", a nezvanično je učestvovao u CIA projektima za korištenje virusa raka u vojne i političke svrhe.

Uprkos svečanom potpisivanju Konvencije o zabrani razvoja, proizvodnje i skladištenja bakteriološkog (biološkog) i toksičnog oružja i o njihovom uništavanju (BTWC) u Moskvi, Londonu i Washingtonu 1972. godine, rad u Fort Detricku bio je u punom jeku i do 1977. proizvedeno je 60 hiljada litara kancerogenih i imunosupresivnih virusa.

U radu su aktivno učestvovali profesori R. Purcell, M. Hillerman, S. Kragman i R. McCollum, koji su koristili “koktel” virusa hepatitisa B u kombinaciji s onkogenom supstancom za eksperimente ne samo na rezus makakima i čimpanzama, već također nad američkim učenicima iz Willowbrook State škole za mentalno retardiranu djecu.
Godine 1971. američka farmaceutska kompanija Lytton Bionetics sklopila je ugovore sa nizom afričkih zemalja za proučavanje pacijenata oboljelih od raka s Birkettovim limfomom, povezanim s infektivnim Epstein-Barr onkovirusom, kao i leukemijom i sarkomom. Zanimljivo je da je Birketov limfom prvi put otkriven u zapadnoj Ugandi nakon što su tamo radile laboratorije američkog Nacionalnog centra za rak, ali i druge medicinske ustanove sponzorirao Rockefeller.

Jedan od stručnjaka, R. King, rekao je 80-ih godina da su stručnjaci iz Sjedinjenih Država zarazili ljude sarkomom kako bi “izolirali genom virusa putem rekultivacije, hibridizacije, rekombinacije virusa, mutacija i drugih tehničkih tehnika”.

Na saslušanjima senatskog crkvenog odbora 1975. dr. Charles Senseney, koji je radio u laboratoriji Fort Detrick, priznao je da je CIA koristila biološki aktivne supstance koje su uzrokovale prolazne srčane bolesti i rak kako bi uništile nepoželjne figure. Demonstrirao je uzorke oružja kojim su zaražene predviđene žrtve. Među njima je bio i kišobran koji je otvarao minijaturne strelice, kao i specijalna puhalica za gađanje igala napravljena od smrznute otrovne supstance. Budući da su debele kao ljudska kosa i dugačke nekoliko milimetara, ove su igle prolazile kroz tkaninu odjeće bez oštećenja i, kada su se ubrizgale, izazivale su bolne senzacije ne gori od uboda komarca, momentalno se rastvarajući pod kožom.

Među "novim proizvodima" američkih bioterorista demonstrirani su i aerosoli za zarazu "meta" smrtonosnim bolestima nakon prskanja iz aviona, kao i "virusi za skakanje" koji se šire insektima (buve, pauci, komarci) koji skaču ili lete sa zaraženih životinja. ljudima. CIA je takođe postala „pionir“ u metodama zaraze: injekcijama, inhalacijama, kontaktom sa kožom kontaminirane odeće, putem probavni sustav kada jedete, pijete, pa čak i koristite pastu za zube.

Brojni stručnjaci smatraju da je jedan od prvih nepoželjnih SAD politički lideri, zaražen novim biološkim oružjem protiv raka, postao je predsjednik Angole Agostinho Neto. Umro je u moskovskoj Centralnoj kliničkoj bolnici 1979. godine u 57. godini od do sada nepoznatog oblika fulminantnog karcinoma. Druga žrtva bio je bivši predsjednik Čilea Eduardo Frey, koji se otvoreno suprotstavio američkom štićeniku, generalu Pinochetu. Frey je umro u bolnici u Santiagu januara 1982. godine, oboljevši od nepoznate, fulminantne bolesti nakon rutinskog medicinskog pregleda.

Dakle, možda će za 50 godina arhive CIA-e biti skinute tajnost, a tajne smrti Huga Chaveza i drugih svjetskih lidera će postati poznate. Postoji toliko ogromna količina dokumentacije o upotrebi virusa raka od strane američkih obavještajnih agencija da postojanje ovog oružja ne postavlja nikakva pitanja. Pitanje je samo kako je to “privedeno” i ko je neposredni izvršilac.

* * *

„U narednih 5-10 godina biće moguće stvoriti sintetički virus koji uopšte ne postoji u prirodi i koji ljudski imuni sistem ne može suzbiti; novi, umjetno stvoreni virusi bit će nedostupni lijekovima, beskorisno je koristiti konvencionalna sredstva za liječenje zaraznih bolesti, antibiotike, vakcine i antidote protiv njih. Ovakvu senzacionalnu izjavu dao je glavni vojni virolog stručnjak D. MacArthur, govoreći 1969. godine pred komisijama američkog Kongresa (“Sykes Commission”), koje je trebalo da daju preporuke o izdvajanju budžetskih sredstava za vojsku. A tražio je malo - samo oko 10 miliona dolara!

Novac je dodijeljen i stotine istraživača i stručnjaka je bilo uključeno u rad. Jedan od kreatora virusa AIDS-a je očigledno bio dr. Robert Gallo, koji je 1987. čak dobio patent od američkog Ministarstva zdravlja kojim se utvrđuje njegov prioritet u pronalasku “virusa koji potiskuje ljudski imuni sistem”.

Bolest je pobjegla iz laboratorija i prvi put je otkrivena u proljeće 1981. godine u Kaliforniji (SAD). I to nije imalo nikakve veze (kao što nas Amerikanci uvjeravaju) sa Afrikom i „malim zelenim majmunima“.

U maju 1987. u London Timesu se pojavio članak u kojem se tvrdi da je vakcinacija protiv velikih boginja u Africi (koju su pokrenuli "humanisti" u Ministarstvu zdravlja SAD) izazvala izbijanje AIDS-a. I milioni ljudi su vakcinisani! Zatim je slična „vakcinacija“ izvršena na Haitiju, Brazilu i drugim zemljama.

Optužbe protiv Sjedinjenih Država za proizvodnju virusa AIDS-a počele su sredinom 80-ih. Profesor na berlinskom Humboldt univerzitetu, Jakob Segal, tvrdio je da je virus "proizvod eksperimenta sprovedenog u laboratoriji s ciljem stvaranja biološkog oružja". U američkim medijima sve je to predstavljeno kao “ Sovjetska propaganda" Ali 90-ih godina, sam dr. Gallo je objavio da je testirao drugu, “alternativnu” vrstu AIDS-a, koja može ući u tijelo preko epitelnih ćelija (tj. kroz kožu), povećavajući rizik od dobijanja bolesti prskanjem. aktivne supstance u atmosferu.

Dr. S. Monteith je bio jedan od prvih koji je još 1981. godine opisao ogroman epidemijski potencijal novog virusa, potencijalno katastrofalne posljedice njegovog korištenja od strane “svjetske elite” i dokazao njegovu vještačku prirodu.

A ovaj novi kvalitet je do sada sprečavao bilo kakve pokušaje stvaranja vakcine protiv AIDS-a. Zbog toga tokom godina nije stvoren nijedan efikasan lek protiv ove bolesti.

Broj zaraženih AIDS-om još uvijek nije poznat, jer čak i u Sjedinjenim Državama vlada sprječava sve inicijative koje imaju za cilj čak i približan broj. Prema različitim procjenama, od 50 do 100 miliona ljudi je zaraženo AIDS-om. Najviše u Africi - u nekim zemljama (Uganda, Kenija) više od 50% stanovništva pati od ove strašne bolesti.

Smatra se da je do danas od AIDS-a umrlo oko 40 miliona ljudi – skoro isti broj koliko je umrlo tokom Drugog svetskog rata!

* * *

Prema podacima Svjetske zdravstvene organizacije, više od 600 ljudi zaraženih ebolom već je umrlo na zapadu "mračnog kontinenta".

Trenutna epidemija bolesti postala je najveća u istoriji medicinskih opservacija.
U Nigeriji, Liberiji i drugim afričkim zemljama na granicama su postavljeni posebni kordoni, a ljekari pažljivo prate sve koji ulaze i izlaze. Ebola groznica se smatra smrtonosnom bolešću kojoj su najosjetljiviji ljudi, primati i svinje. Ne postoji vakcina za to.

Epidemija je počela u Gvineji u martu ove godine. Do danas se bolest širi na nove teritorije u Sijera Leoneu, Liberiji i Maliju. Strahuje se da će se proširiti ne samo po zapadnoj Africi, već i prodrijeti u Evropu.

Zanimljivo je da su u žarištima epidemije naglo porasli slučajevi napada lokalnog stanovništva na urede međunarodne organizacije Doktori bez granica. Lokalno stanovništvo optužuje ljekare da su virus donijeli u regiju. Došlo je do masovnih protestnih demonstracija protiv afričkih vlada koje ne čine ništa da isprave situaciju.

Pogromi kancelarija “uvažene međunarodne organizacije” predstavljaju se u zapadnoj štampi kao primjeri “iracionalnosti i apsurda”. Štaviše, „Ljekari bez granica“ na svaki mogući način veličaju svoje etičke principe, uvjeravajući da su „uvijek bliski žrtvama“. Ali nisu li to njihove vlastite žrtve, kako vjeruju “nerazumni” Afrikanci?

Zašto zapadni doktori tvrdoglavo odbijaju da napuste Gvineju, Liberiju, Mali i Sijera Leone? Uostalom, ove zemlje su zahvaćene haosom građanskih ratova i sukoba, u kojima aktivno učestvuju evropske zemlje i Sjedinjene Države. Samo Francuska je potrošila stotine miliona eura na vojne operacije u Maliju.

Sve - za obnovu kolonijalne moći u zapadnoj i sjevernoj Africi. I upravo su te teritorije „očišćene“ od lokalnog stanovništva tokom epidemija ebole i drugih zaraznih bolesti. Štaviše, iznenađujuće, stradaju samo lokalni stanovnici, ali ne i „mirotvorci“ iz Francuske.

A “liječnici bez granica” ne prenose lijekove i opremu lokalnim vlastima i ne napuštaju zonu sukoba. Upravo to lokalnim stanovnicima daje dobar razlog da sumnjaju na strane "eskulape" da su oni ti koji šire nove vrste zaraze među Afrikancima.

Prema mnogim stručnjacima, tamo se testira novo "etničko" oružje, koje djeluje selektivno - samo na Afrikance. Ali očigledno postoje modifikacije za druge rasne i etničke grupe. Godine 2006, jedan od vodećih američkih virologa Eric Pianka, govoreći na svečanom skupu na Univerzitetu u Teksasu, rekao je da je uz pomoć novog soja ebole groznice (po njegovim riječima, "sa fantastičnom smrtonosnošću") moguće " za dobrobit planete” smanjiti čovječanstvo za 90%. Američki virolozi prisutni u sali jednoglasno su ustali i aplauzirali mu...

* * *

Od 70-ih godina u Sjedinjenim Državama se odvija ubrzani razvoj “etničkog oružja”. I kako mnogi stručnjaci vjeruju, sada su izmišljeni novi sojevi smrtonosnih virusa koji se mogu širiti samo u određenoj etničkoj sredini.

Dakle, “SARS” najviše pogađa Kineze i stanovnike jugoistočne Azije, ebolu i AIDS – Afrikance. Izraelski naučnici pokušavaju stvoriti slično biološko oružje usmjereno protiv Arapa.

Britansko medicinsko udruženje je nedavno izjavilo da bi “progresivni razvoj genetike mogao dovesti do etničkog čišćenja u neviđenim razmjerima u narednim godinama”.

Ideja o uspostavljanju “biološke dominacije nad svijetom” više ne sazrijeva ne samo u glavama ludih virologa kanibala, već i u proračunima političara, vojnih stratega i stručnjaka! Tako su ovu ideju nedavno iznijeli ugledni neokonzervativni američki političari u izvještaju “Nove granice za odbranu Amerike”.

U njemu se kaže da se, naravno, vojna dominacija nad svijetom prije svega mora osigurati balističkim i krstarećim projektilima, radio-kontrolisanim avionima („dronovi“) i podmornicama, te satelitskim oružjem. Ali, uz to, „tokom narednih godina umjetnost ratovanja u zraku, na kopnu i na moru bit će potpuno drugačija od sadašnje, a bitke će se voditi u novim dimenzijama – u svemiru, cyber prostoru, također kao na intracelularnom i mikrobnom nivou." I dalje se kaže da će „napredni oblici biološkog oružja, koji će za mete odabrati određene ljudske genotipove, moći da ovaj pravac iz sveta terora dovedu na mesto koje mu pripada među politički opravdanim sredstvima“!

* * *

Američke vlasti su dobro naučile lekcije iz Projekta Manhattan, posebno prenosa podataka o atomskom oružju u Sovjetski Savez od strane vodećih svjetskih fizičara. Američki naučnici to nisu radili zbog novca, već na osnovu trezvene procene svoje vlade, koja ne bi oklevala da bombarduje SSSR i sve druge potencijalne konkurente na putu svetske dominacije.

Stoga, programeri novih virusa sada podliježu najstrožim pravilima za eliminaciju „nepoželjnih svjedoka“. Stopa mortaliteta među njima je desetine puta veća od statističkog prosjeka.

Nezavisni američki stručnjaci izbrojali su više od stotinu “misterioznih” smrti (u avionskim i automobilskim nesrećama, od “nepoznatih” bolesti, “nesreća”) među virolozima i mikrobiolozima koji rade po ugovorima za CIA-u i Ministarstvo obrane.

2001. godine, odmah nakon eksplozije “kula od palačinki”, svi Amerikanci su bili uznemireni vijestima o pismima sa sporama antraksa koja su poslana u redakcije časopisa, novina, TV kuća i političkih ličnosti. Zaraženo je 17 osoba, pet je umrlo. Ova pisma su bila glavni razlog političkog zaokreta koji je usmjerio američku agresiju na Irak. Al-Kaida je nestala u mraku, a svi mediji su objavili da je "najveći biološki napad u istoriji SAD" organizovao Sadam Husein.

Kada je ovaj zaokret zacementiran (i kasnije korišten za optuživanje Huseina za razvoj biološkog oružja, što je postalo jedan od argumenata za invaziju na Irak), brzo je postalo jasno da se soj virusa mogao dobiti samo iz laboratorija CIA-e u Fort-u. Detrick. Tamo su pronašli "slabu kariku" - virologa Brucea Ivinsa, koji se, kao pobožni katolik, često žalio da mu se ne sviđa njegov rad iz vjerskih razloga. A u julu 2008. godine navodno je izvršio samoubistvo gutajući snažne droge. Nakon toga, FBI ga je ukazao na „pomahnitalog teroriste“ koji je slao pisma sa infekcijom. Nije obavljena obdukcija, nije bilo istrage, a slučaj je brzo zatvoren.

Zanimljivo je da je ponovio sudbinu jednog od vodećih mikrobiologa 50-ih, Franka Olsona, koji se također bavio antraksom i podnio ostavku na Fort Detrick, ne želeći sudjelovati u razvoju smrtonosnog oružja. A nekoliko dana kasnije, u novembru 1953., prema izvještaju FBI-a, “u stanju nervnog sloma, skočio je sa 10. sprata hotela Pennsylvania”.

Jedan od najpoznatijih slučajeva bilo je "samoubistvo" najvećeg britanskog stručnjaka za biološko oružje, Davida Kellyja. Posjetio je Irak na desetine puta u sklopu raznih misija UN-a radi inspekcija. Nakon invazije dao je senzacionalnu (prvu!) izjavu da su svi "dokumenti" o prisustvu hemijskog i bakteriološkog oružja S. Husseina, koje su američke i britanske vlasti predstavile u UN-u i koji su poslužili kao povod za rat , bili su "grubi lažnjaci". Pozvan je u parlament, gdje mu u suštini nije bilo dozvoljeno da otvori usta tokom saslušanja, napadajući ga prijekorima i optužbama.

Nekoliko dana kasnije, 17. jula 2003., on je, kao i uvijek, otišao u jutarnju šetnju, a njegovo tijelo pronađeno je sutradan na kilometar od kuće. U službenom izvještaju se navodi da je izvršio samoubistvo tako što je progutao 30 tableta za spavanje, a potom nožem prerezao venu na lijevom zglobu. Ali ljekari hitne pomoći (očigledno ne znajući za „naredbu“) su primijetili da ispod leša nema krvi. Shodno tome, Kelly se otrovao, prerezao venu, a onda je, krvareći, i sam stigao do mjesta gdje je pronađen!

U Sjedinjenim Državama, jedan od najozloglašenijih događaja bila je avionska nesreća u martu 2002. godine, u kojoj je poginuo Stephen Mostow, vodeći virolog koji je radio u Medicinskom centru u Koloradu. Zvali su ga "gospodin grip" jer se uglavnom specijalizovao za ovu bolest.

Među poginulima je bilo mnogo ljudi iz naše zemlje koji su iz raznih razloga otišli da „traže sreću“ na Zapadu. Najprimetniji je bio “srčani udar” 2001. godine kod mikrobiologa V. Pasečnika, koji je bio zavidnog zdravlja. Zapad ga je (kao i mnoge druge Ruse) koristio 200% - i kao specijaliste i kao "razotkrivača strašnih zavjera Kremlja protiv Sjedinjenih Država i cijelog slobodnog svijeta".

Godine 1989. odlazi u Englesku i tamo radi u jednom od viroloških centara. Usput je zarađivao pričajući priče o sovjetskom "binarnom biološkom oružju" zvanom "Novichok", da su svi poznati virusi odavno savladani u tajnim laboratorijama KGB-a, a da su se već pojavili novi. Oni mogu izazvati takve "monstruozne bolesti" kao što su multipla skleroza i artritis kod nesuđenih Amerikanaca.

Ove horor priče su bile korisne jer su davale izgovor za istiskivanje budžetskih sredstava za „bioodbranu“ (u stvarnosti, za razvoj novih smrtonosnih sojeva). Ali onda su odlučili da je pričljivi Pasečnik previše pričao o virološkom centru u Sailsburyju, u kojem je radio 10 godina, i poslali ga na drugi svijet...

* * *

"Putinova raketa", "ruka Moskve", "Putine, ubio si mi sina!" - Zapadni časopisi i novine bili su prepuni ovakvih naslova nakon što je 17. jula ove godine nad nebom Ukrajine oboren putnički avion Boeing koji je leteo iz Holandije za Melburn. Ova histerija je počela odmah nakon govora američkog predsjednika Obame, koji je rekao da je riječ o "zločinu nezamislivih razmjera" i okrivio Rusiju. Odmah u rukama sekretara za štampu Bijele kuće i State Departmenta pojavile su se neke mutne fotografije koje su stigle iz CIA-e i "nepobitno upućuju" na to da je avion oboren ruskim projektilom Buk.

Ovaj događaj je poslužio kao povod za potpuno uvođenje ekonomskih sankcija protiv Rusije, uključivanje zemalja EU (prije katastrofe su oklijevale da li da podrže Sjedinjene Države), korištenje gotovo svih zabranjenih ratnih sredstava za suzbijanje otpora u Novorosiji (uključujući fosforne bombe, balističke rakete, kasetne bojeve glave itd.), implementaciju planova za stvaranje antiruskog vojnog bloka uz učešće Ukrajine, Moldavije, Poljske, Gruzije i baltičkih zemalja.

Samo mjesec dana kasnije počeli su da se pojavljuju materijali da rupe u kokpitu i trupu dokazuju da je avion oboren u zraku, najvjerovatnije od strane lovca ukrajinskog ratnog zrakoplovstva. Ovu verziju potvrđuje nagla promjena u ruti Boeinga neposredno prije katastrofe. Međutim, djelo je već učinjeno, svi zapadni mediji su odmah zaboravili na avion, a sankcije i rat punog razmjera protiv ruskog naroda na istoku Ukrajine ne samo da su na snazi, već se i dalje intenziviraju.

Postoje svi znakovi “okidačkog događaja” ili “falsifikovanog incidenta” (false flag incident) – tako majstori provokacija iz CIA-e nazivaju terorističke napade koji su osmišljeni da okrenu javno mnijenje u smjeru potrebnom za Sjedinjene Države Države, pokrenuti lanac događaja koji će dovesti do ostvarenja ciljeva "imperije". Ovo je oduvek bio slučaj u istoriji SAD - eksplozija sopstvenog bojnog broda Maine, koja je postala izgovor za objavu rata Španiji 1898. godine; planirano potonuće putničkog parobroda Lusitanija za ulazak u povoljan trenutak u prvom svjetski rat; namjerno prikrivanje informacija o predstojećem japanskom napadu na američku bazu u Pearl Harboru 1941. godine radi ulaska u Drugi svjetski rat; provokacija granatiranjem američkog razarača Maddox u zaljevu Tonkin radi objave rata Vijetnamu 1964.; bombardovanje kula bliznakinja 2001. godine kako bi se započeo „Rat protiv terorizma“ i pripremio se za invaziju na Irak i Avganistan.

Kao što se često dešava u ovakvim terorističkim napadima, ne teži se jednom, već nekoliko ciljeva. U ovom slučaju, od velikog je interesa podatak da je na MH17 bilo više od stotinu mikrobiologa koji su letjeli na međunarodni kongres o AIDS-u u Australiju. A među njima je i J. Lange, vodeći virolog sa Univerziteta u Amsterdamu.

„Nenadoknadiv gubitak najvećeg vizionara i titana u proučavanju AIDS-a“, „tragična smrt vodećeg svetskog specijaliste za lečenje bolesti veka“, pisalo je u nekrolozima objavljenim u naučni časopisi. I zaista, Langeov laboratorij zauzeo je vodeću poziciju u proučavanju AIDS-a i metoda njegovog liječenja, uključujući kombiniranu upotrebu lijekova, antiretrovirusnu terapiju i razvio načine za sprječavanje prijenosa virusa s majke na dijete. Nekoliko godina (2002–2004) bio je na čelu međunarodne organizacije za borbu protiv AIDS-a. Zajedno s njim na brodu su bile i njegove holandske kolege Jacqueline van Tongeren, M. Adriana de Schutter, L. Vann Mens i drugi naučnici. Moguće je da su sa sobom ponijeli rezultate dugogodišnjeg rada, možda čak i dugo očekivani lijek za ovu monstruoznu bolest - uostalom, neposredno prije konferencije, zaposlenici Langea rekli su da bi njegov govor trebao napraviti senzaciju u naučnom svijetu .

U istom tom Boeingu (navodno, sudbonosnom koincidencijom) leteo je predstavnik Svjetske zdravstvene organizacije (WHO) Glenn Thomas, koji je “kaznjen” davanjem intervjua u kojem je spomenuo zločinačku ulogu svoje organizacije u širenju epidemija ebole u zapadnoj Africi.

Uništavajući evropske istraživače AIDS-a, kao i poštenog funkcionera SZO, Amerikanci su time dali lekciju svima onima koji se iskreno trude da izliječe AIDS i ebolu: „Nema potrebe liječiti i spriječiti ove bolesti, one su vrlo korisne za nas za uništenje ljudske rulje koja se razmnožava.”

Nije slučajno što se u nizu članaka podsjeća da se 1998. godine avion Swissaira srušio iznad Atlantika, u kojem je bio jedan od briljantnih istraživača AIDS-a, Jonathan Mann, i njegova supruga M. L. Clements, također poznati virolog. Mann je bio na čelu strukture Svjetske zdravstvene organizacije osmišljene za borbu protiv AIDS-a i, kako su napisale njegove kolege, njegova smrt je zadala snažan udarac svim planovima za organiziranje borbe protiv ove strašne bolesti. Uzroci pada još nisu razjašnjeni (niko od ozbiljnih stručnjaka ne vjeruje u zvaničnu verziju da je jednom od pilota otpao opušak i to izazvalo požar unutrašnja obloga avion).

* * *

Sjedinjene Države koriste ogroman arsenal biološkog oružja protiv nas: GMO i transgene biljke i organizme (od kojih mnogi, prema dokazima zapadni eksperti izazivaju supresiju imunog sistema, rak, neplodnost i bolesti mozga), godišnje organizuju desetine epidemija novih virusa gripe, bolesti životinja („svinjska“ i „ptičja gripa“), biljaka, šire razne alergijske bolesti, prodaju lekova i vakcina sa nama nepoznato” nuspojave», dodataka ishrani itd. Sve više i više novih virusa se razvija: smrtonosni „hantavirus“, rekombinantni „australski virus ubica“ zasnovan na boginjama, nova generacija „nesmrtonosnih“ (samo potpuno „onesposobljenih“) bolesti, „bioregulatori“ sposobni stvaraju depresiju, mijenjaju srčane ritmove, dovode do nesanice. Moguće je da se stvaraju biološki "markeri" - latentni virusi koji bi se trebali aktivirati nakon određenog vremena.

Američke vojne biološke laboratorije stvaraju se oko Rusije: u Gruziji (gdje je, prema riječima stručnjaka, 2013. godine nastala epidemija svinjske kuge), Kazahstanu, Kirgistanu i baltičkim državama. Američke vlasti izdvajaju ogromne količine novca kako za razvoj novih virusa tako i za bioodbranu (više od 6 milijardi dolara godišnje se troši samo na program Bioshield).

U našoj zemlji se, nakon raspada Sovjetskog Saveza, dugo vremena gotovo nije poklanjala pažnja ovoj najvažnijoj oblasti zaštite zemlje. Zatvoreni instituti i centri, mladi specijalisti otišli na Zapad. Ostali su samo entuzijasti i stariji naučnici koji rade za male plate (18 hiljada su viši istraživači, 27 hiljada profesori, doktori nauka).

Oronule zgrade, zastarela oprema, „dodatni pritisak“ liberalnih zvaničnika. Došlo je do toga da je 2000. godine Chubaisov Mosenergo, zbog "nedovoljnog plaćanja", pokušao isključiti struju Institutu za virusologiju Ivanovsky. Ne samo da bi jedinstvena kolekcija mikroorganizama bila uništena, već bi neki od uzoraka virusa mogli pobjeći u atmosferu! Tada smo samo čudom uspjeli da se izborimo sa „efikasnim menadžerima“. A konačni udarac zadala je "reforma" Ruske akademije nauka - zapravo, njena likvidacija i prelazak upravljanja u ruke "efikasnog" računovođe iz Krasnojarska.

Niko se nije mešao u pravi lov agenata CIA-e na patriotske naučnike, koji su jednostavno uništeni na teritoriji naše zemlje! U januaru 2002, A. Brushlinsky, dopisni član Ruske akademije nauka, direktor Instituta za psihologiju, psiholog i biolog, autor radova o prepoznavanju terorista, pretučen je na smrt bejzbol palicama (tako da su znali gdje je naredba). zbog likvidacije!) i zadavljen u ulazu svoje kuće u Moskvi. Dvije godine nakon njegove smrti ubijen je njegov zamjenik, profesor V. Druzhinin.

U novembru 2002. godine, profesor B. Svjatski, specijalista za dečje infekcije sa Ruskog državnog medicinskog univerziteta po imenu. Pirogov. Dopisni član Ruske akademije medicinskih nauka, vodeći virolog i mikrobiolog, specijalista za biološko oružje L. Stračunski, pretučen je na smrt bejzbol palicama 2005. godine u svojoj sobi u moskovskom hotelu Slavjanka. Godine 2006. ubijen je genetičar i biolog, dopisni član Ruske akademije nauka L. Koročkin.

Ogroman gubitak za domaću mikrobiologiju bila je smrt šefa Odsjeka za mikrobiologiju Ruskog državnog medicinskog univerziteta, profesora V. Korshunova, jednog od vodećih svjetskih virologa, priznatog specijaliste za biološka „protuoružja“. Pedesetšestogodišnjeg naučnika pretukli su na smrt 2002. godine "nepoznati huligani", nekoliko dana nakon što je objavljen novinski članak u kojem se navodi da je naučnik na ivici najveće otkriće- univerzalna vakcina protiv bilo kakvog biološkog oružja! Kao rezultat smrti Koršunova, obustavljen je rad u najvažnijoj oblasti nauke. Stotine, ako ne i hiljade ljudi u Rusiji osuđeno je na smrt zbog obustave istraživanja.

Tragične stranice moderna istorija uvjereni su da su Sjedinjene Države u svojoj maničnoj želji za svjetskom dominacijom sposobne za bilo koje, najvarvarskije i najzločinnije akcije. Značajno je da zemlje u koje vrše invaziju pod izgovorom “zaštite ljudskih prava”, “humanizma” i “demokratije” postaju ne samo poprište najakutnijih građanskih ratova, već su praćene i epidemijama raznih novih, dotadašnjih nepoznate bolesti. Ogromne mase ljudi u Vijetnamu, Jugoslaviji i Iraku bile su izložene mutagenim supstancama, što je dovelo do strašnih posljedica. Strašni deformiteti među bebama, stvaranje čitave generacije degenerika, nepovratne promjene na genetskom nivou koje će uticati na sve buduće generacije – neke su od posljedica “humanitarnih akcija”.

Štaviše, međunarodne organizacije, uključujući UN, koje su trenutno pod punom kontrolom SAD-a, igraju ulogu „pokrića“ u provedbi ovog genocida. Svjetska zdravstvena organizacija (WHO), Ljekari bez granica i druga do tada autoritativna tijela pišu svoje “objektivne izvještaje” po diktatu Zapada i više im se ne može vjerovati. Oni su djelovali u sprezi sa agresorima u Iraku, Afganistanu i Libiji.

Uoči američke invazije na Irak, oni su poslušno zaključili da Sadam Husein posjeduje “ogromne zalihe biološkog i hemijskog oružja”, što je poslužilo kao jedan od glavnih argumenata da SAD započnu rat. Prošle godine su optužili sirijsku vladu da je koristila hemijsko i biološko oružje protiv svog naroda kada je oko 300 ljudi ubijeno u augustu od nervnog plina sarina u predgrađu Damaska. Iako su do tada primljeni jaki dokazi da su sarin koristili militanti iz Al-Qaide, a nije nabavljen ni od kuda, već iz američkih skladišta.

* * *

Nemilosrdno uništavanje konkurenata i, zapravo, biološka tiranija Sjedinjenih Država uništava suverenitet perifernih zemalja svijeta, tjerajući ih da se oslanjaju na pomoć, stručnost i lijekove iz inozemstva. Takva kolonijalna ovisnost podriva sigurnost naroda, čini ih taocima Zapada, „laboratorijskim štakorima“ za razne medicinske i biološke eksperimente usmjerene protiv njihovog zdravlja i života.

Jedina protivteža carstvu bioterorizma može biti odbacivanje opakog “globalizma” i izgradnja multipolarnog svijeta. Sve zemlje moraju, korak po korak, odbiti saradnju sa Sjedinjenim Državama i NATO-om, postojećim proameričkim međunarodnim organizacijama. Potrebno je zaključiti sporazume na međudržavnom nivou. Stoga, u Africi, države moraju raditi zajedno u borbi protiv novih uvedenih sojeva ebole. U jugoistočnoj Aziji - protiv najakutnijeg novog sindroma "SARS". Na nacionalnom nivou treba da vodimo računa o našoj nauci, stvaramo sopstvenu nacionalne institucije i laboratorije, moćne naučni centri za suzbijanje virusnog i genetskog oružja.

Nikolaj Ivanov